海洋甾體(YC-1、5、6)與MK-801對心功能的影響及相關(guān)機制研究.pdf

1、甾體激素可由神經(jīng)組織自身合成。由腦組織合成的甾體激素稱為神經(jīng)甾體(neurosteroids)。神經(jīng)組織中有活性作用的甾體,無論是否由腦內(nèi)合成,無論天然的還是合成的統(tǒng)稱為神經(jīng)活性甾體(neuroactive steroids)。
　　 除經(jīng)典的基因組機制外,近年來發(fā)現(xiàn)甾體激素對神經(jīng)系統(tǒng)還具快速的調(diào)節(jié)作用,這一作用的發(fā)揮通常只需要數(shù)秒甚至更短的時間,提示是一種非基因效應。實驗表明神經(jīng)活性甾體可以作用于經(jīng)典神經(jīng)遞質(zhì)的受體,對其介導的

2、反應進行調(diào)節(jié),其中包括GABAA受體,谷氨酸受體(如:NMDA受體,AMPA受體),σ受體等。
　　 神經(jīng)活性甾體對神經(jīng)系統(tǒng)的功能活動有著廣泛的調(diào)節(jié)作用。神經(jīng)活性甾體與神經(jīng)元興奮毒性死亡、凋亡有著密切的關(guān)系,并對學習記憶有著重要的影響。
　　 我們實驗室近兩年來發(fā)現(xiàn)一系列甾體新化物具有神經(jīng)保護作用。本文實驗觀察海洋甾體YC-1、5、6對大鼠心功能的影響,以心肌梗死模型和原代培養(yǎng)的心肌細胞為實驗材料,采用免疫印跡、膜片鉗及

3、逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈式反應等技術(shù)從整體、細胞、分子三個水平對YC—1、5、6、MK-801的作用及其機制進行探討,為神經(jīng)活性甾體在心血管系統(tǒng)作用及機制的探索提供實驗依據(jù)。
　　 實驗一:海洋甾體YC1對大鼠心功能的影響及機制研
　　 本實驗觀察YC1對低氧心肌細胞及心肌梗死(AMI)大鼠心功能的影響,探討其相關(guān)機制。方法采用電鏡、HE染色、免疫組織化學等實驗技術(shù),復制心肌梗死模型,利用多導生理記錄技術(shù)記錄心功能的變化。結(jié)果心肌

4、梗死大鼠給予YC-1干預后,與心肌梗死組比較,YC-1干預組大鼠心功能明顯改善,心肌梗死區(qū)超微結(jié)構(gòu)損傷明顯減輕,心肌梗死8h后心肌酶LDH和CK明顯減少(P<0.01),心電圖顯示ST段回落明顯。
　　 實驗二:海洋甾體YC5對大鼠心功能的影響及機制研
　　 本實驗觀察YC5對AMI大鼠心梗面積、心功能及心肌細胞凋亡的影響,并探討其相關(guān)機制,為尋找AMI更加有效的治療藥物奠定實驗基礎(chǔ)。方法采用HE染色、免疫組織化學、原位

5、雜交等實驗技術(shù),復制心肌梗死模型,利用多導生理記錄技術(shù)記錄心功能的變化。結(jié)果大鼠心肌梗死后給予YC-5干預,與對照組比較,YC-5干預組大鼠心功能明顯改善,心肌梗死區(qū)損傷明顯減輕,心肌梗死面積明顯減少(P<0.01),Bcl-x的表達增加(P<0.01),Bax的表達減少(P<0.01),心肌凋亡減輕。
　　 實驗三:海洋甾體YC6對大鼠心功能的影響及機制研究
　　 本實驗觀察YC6對心肌細胞及心功能的影響,探索其相關(guān)機

6、制,為心血管疾病的治療尋找新途徑。方法采用HE染色、膜片鉗、低養(yǎng)培養(yǎng)心肌細胞、免疫組織化學、原位雜交等實驗技術(shù),復制心肌梗死模型,利用多導生理記錄技術(shù)記錄心功能的變化。結(jié)果大鼠心肌梗死后給予YC-6干預,與對照組比較,YC-6干預組大鼠心功能明顯改善,心肌梗死區(qū)損傷明顯減輕,單個心室肌細胞舒張性明顯改善(P<0.01),抑制單個心室肌細胞鈣瞬變(P<0.01),抑制心肌細胞L型鈣電流(P<0.01),抑制NMDA—NR1表達(P<0.0

7、1)。
　　 實驗四:MK-801對大鼠心功能的影響及機制研究
　　 本實驗觀察MK-801對心肌細胞及心功能的影響,探索NMDAR1在心臟中作用的相關(guān)機制和生理學意義,為心血管疾病的治療尋找新途徑。方法采用HE染色、膜片鉗、低養(yǎng)培養(yǎng)心肌細胞、免疫組織化學、原位雜交等實驗技術(shù),復制心肌梗死模型,利用多導生理記錄技術(shù)記錄心功能的變化。結(jié)果大鼠心肌梗死后給予MK-801干預,與對照組比較,MK-801干預組大鼠心功能明顯改善

8、,心肌梗死區(qū)損傷明顯減輕,抑制單個心室肌細胞收縮(P<0.01),抑制單個心室肌細胞鈣瞬變(P<0.01),抑制心肌細胞L型鈣電流(P<0.01)。
　　 結(jié)論:1.YC-1對心肌梗死大鼠心功能具有保護作用,其作用可能與NMDA受體相關(guān)。2.YC-5對心肌梗死大鼠心功能具有保護作用,其作用可能與抑制心肌細胞凋亡有關(guān)。3.海YC-6對心肌梗死大鼠心功能具有保護作用,其作用與YC-6能夠抑制心肌收縮和心肌L-型鈣電流有關(guān),這一作用可