辛伐他汀干預骨質(zhì)疏松大鼠骨髓基質(zhì)細胞后microRNA的差異表達研究.pdf

1、目的:探討在microRNA(miRNA)水平,辛伐他汀促進骨髓基質(zhì)細胞成骨的可能機制及骨質(zhì)疏松癥發(fā)生的可能機制。
　　 方法:將3月齡SD大鼠隨機分成2組,卵巢切除組及假手術組,每組10只。適應性喂養(yǎng)1周后手術(卵巢切除組經(jīng)腹腔切除雙側(cè)卵巢,假手術組同樣的方法在雙側(cè)卵巢附近取等量的脂肪組織)。術后12周經(jīng)確認骨質(zhì)疏松模型建立成功后,取股骨、脛骨骨髓腔細胞,全骨髓培養(yǎng)法培養(yǎng)離體骨髓基質(zhì)細胞。骨髓基質(zhì)細胞擴增至第三代時,細胞分為三

2、個處理組:骨質(zhì)疏松骨髓基質(zhì)細胞+辛伐他汀組(OP+SIM)、骨質(zhì)疏松骨髓基質(zhì)細胞組(OP+K)、正常骨髓基質(zhì)細胞組(N+K)。培養(yǎng)第1～7天以MTT法測量各組細胞的生長曲線；第10天時檢測各組細胞的堿性磷酸酶活性及骨鈣素含量,并抽提各樣本的RNA行miRNA芯片檢測；培養(yǎng)第14天時行vonkossa染色觀察各組細胞的體外誘導礦化能力；最后根據(jù)miRNA芯片的檢測結(jié)果進行GO功能分析及Pathway分析研究辛伐他汀促進骨髓基質(zhì)細胞成骨的可

3、能機制及骨質(zhì)疏松癥發(fā)生的可能機制。
　　 結(jié)果:(1)在三組細胞中,骨質(zhì)疏松骨髓基質(zhì)細胞+辛伐他汀組的堿性磷酸酶活性、骨鈣素含量均明顯高于另外兩組(P<0.05),正常骨髓基質(zhì)細胞組次之,骨質(zhì)疏松骨髓基質(zhì)細胞組最低。(2)miRNA芯片檢測:骨質(zhì)疏松骨髓基質(zhì)細胞+辛伐他汀組與骨質(zhì)疏松骨髓基質(zhì)細胞組相比較,有20種miRNA表達上調(diào),27種miRNA表達下調(diào)；骨質(zhì)疏松骨髓基質(zhì)細胞組與正常骨髓基質(zhì)細胞組相比較,有27種miRNA表達