運動聯(lián)合中藥早期干預去卵巢后骨質(zhì)疏松的實驗研究.pdf

1、背景：隨著老齡化人口的到來,骨質(zhì)疏松癥(osteoprosis,OP)不僅已成為一個世界范圍內(nèi)嚴重的公共衛(wèi)生問題,而且骨質(zhì)疏松癥僅次于心血管疾病、腫瘤和糖尿病之后,成為當前世界性的主要公共健康問題。骨質(zhì)疏松影響全球約2億人,其中80％是女性。婦女絕經(jīng)后卵巢功能下降,雌激素分泌急劇減少,骨代謝平衡破壞,骨吸收大于骨形成,骨量逐漸減少,形成絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥(Postmenopausal osteoporosis,PMO)。PMO造成患者疼痛

2、及骨骼變形,骨折發(fā)生率增加,嚴重影響婦女的生活質(zhì)量,由骨折引起的高致殘率不僅嚴重危害婦女健康,而且增加社會、家庭的經(jīng)濟負擔。因此,如何對PMO進行早期干預不僅是醫(yī)學問題,還是社會問題。由于骨質(zhì)的丟失是漸進的、不可逆的過程,目前醫(yī)學上還沒有安全而有效的根治方法,所以必須在PMO發(fā)生之前就開始進行早期干預。有很多藥物如降鈣素、二磷酸鹽可以用來治療骨質(zhì)疏松癥,由于需要口服或注射等不便因素,加上其長期應用的安全性還不確定,所以還不適用于預防骨質(zhì)

3、疏松。絕經(jīng)后婦女HRT是公認的防治PMO的方法。但是據(jù)美國健康啟動計劃(WHI)研究結果表明,雖然HRT后骨質(zhì)疏松性骨折的發(fā)生率有顯著下降,但長期HRT治療增加冠心病、腦卒中、乳腺癌和血栓栓塞的發(fā)生率,此項研究因此而被迫終止。因此,雌激素不能作為預防PMO的一線用藥。運動時骨骼在肌肉張力和機械應力作用下,使骨內(nèi)壓發(fā)生改變,進而刺激成骨細胞生成。維持骨量,增加骨密度,使骨彈性增加,抗彎曲、擠壓和扭轉(zhuǎn)能力增強。運動還可增強肌肉力量,提高平衡

4、能力,減少跌倒的危險性,從而可以降低因骨質(zhì)疏松引起的骨折的發(fā)生率。因此運動對預防絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松有積極效果。目前,運動療法是惟一防治的非藥物療法。但據(jù)研究,運動對絕經(jīng)后婦女骨量增加部位是運動肌肉的附著處,并不能改善全身的骨質(zhì)疏松狀態(tài)。因此僅靠運動對PMO進行早期干預是不夠的。祖國醫(yī)學認為腎虛是PMO致病之本,并與脾虛、血淤兩個因素有關。臨床許多報道益腎健脾輔以活血化淤中藥治療PMO療效是肯定的。但對絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥的作用機理有待于進一步深

5、入。許多中藥配方中富含植物性雌激素的中藥淫羊藿、黃芪等。目前有關植物性雌激素安全性研究不多。運動聯(lián)合中藥長期使用防治PMO已有臨床經(jīng)驗性報道,但這些報道對其療效缺乏嚴格的實驗對比設計,其安全性及作用機制的研究較少。近年來有關成骨細胞分化過程調(diào)控機制的研究為開發(fā)促進骨形成藥物提供了許多臨床研究實驗基礎,也為臨床上評價抗骨質(zhì)疏松藥物的療效提供依據(jù)。Osterix(Osx)是近十年發(fā)現(xiàn)的成骨細胞分化和骨形成過程中所必需的轉(zhuǎn)錄因子。中藥和運動是

6、否能增加成骨細胞特異性基因表達尚未見報道。
　　研究目的：本研究旨在通過觀察運動、中藥以及運動與中藥聯(lián)合作用對去卵巢雌性大鼠骨量、骨密度和骨生物力學性能以及股骨上端成骨細胞特異性轉(zhuǎn)錄因子Osx表達的影響,為有效防治骨質(zhì)疏松癥提供實驗和理論依據(jù),Osx表達來更客觀地評價運動聯(lián)合中藥骨疏康早期預防骨質(zhì)疏松療效和推測可能的機制。
　　材料和方法：三月齡去卵巢大鼠為絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥模型,利用單純中等程度的跑臺運動(OVX+ET,7例

7、)、單純骨疏康治療(OVX+GSK,8例)、運動協(xié)同骨疏康治療(OVX+GSK+ET,8例)去卵巢大鼠,并以假去勢組(SHAM,8例)為正常對照,以口服倍美力組(OVX+ES,8例)為陽性對照,以不加干預措施的去勢組(OVX,7例)為病例對照,治療終止時間為3月。治療結束時測量各組體重、子宮濕重、血清E2濃度測定;雙能x線測量各組大鼠股骨和第五腰椎的骨密度、股骨干重灰重測定;股骨三點應力試驗和腰椎壓縮試驗檢測骨生物力學性能;股骨下端骨組

8、織切片HE染色觀察骨組織形態(tài)學變化;Realtime PCR檢測股骨近端組織Osx mRNA的表達。統(tǒng)計學分析前述各組指標的差異。
　　結果：1.大鼠體重增加去勢前各組大鼠體重無差異,治療結束時,OVX組大鼠體重增加最多,與SHAM組和OVX+ES組有顯著差異(P<0.01);OVX+ET以及OVX+ET+GSK組體重顯著低于OVX;單純中藥治療組大鼠體重與OVX比較無差異。2.子宮濕重和血清雌二醇濃度子宮濕重和血清雌二醇濃度在S

9、HAM、OVX+ES最高,與其它四組有統(tǒng)計學差異。SHAM和OVX+ES無明顯差異,OVX+GSK+ET、OVX+GSK、OVX+ET、OVX組子宮重量依次順減,但無統(tǒng)計學差異。3.大鼠股骨灰重/干重和股骨、腰椎體骨密度大鼠股骨灰重/干重和股骨、腰椎體骨密度在OVX+GSK+ET組顯著高于OVX+ET、OVX+GSK、OVX,有統(tǒng)計學差異,但達不到SHAM組和OVX+ES水平;OVX+GSK顯著高于OVX和OVX+ET;OVX和OVX+

10、ET兩組之間無差異。4.生物力學性能測試L5腰椎壓縮試驗最大載荷、最大應力及彈性模量除雌激素組外在去卵巢各組之間無顯著差異。股骨三點彎曲試驗最大載荷在OVX+GSK+ET和OVX+ET最強(P<0.01),最大應力、彈性模量接近SHAM組和OVX+ES組水平,和OVX組相比有顯著性差異(P<0.05),其它去卵巢組之間無明顯差別。5骨組織形態(tài)學股骨下端HE染色OVX組骨小梁橫徑變窄,數(shù)目減少,排列不整齊,間隙很大,骨小梁有斷裂現(xiàn)象,松質(zhì)

11、骨骨髓腔脂肪細胞增多。SHAM、OVX+ES骨小梁橫徑寬,數(shù)目較多,排列整齊緊密,骨小梁無斷裂,松質(zhì)骨髓腔脂肪細胞較少。OVX+ET+GSK組的骨組織切片圖像髓腔脂肪細胞較OVX減少,骨小梁比OVX粗大。6 osterix mRNA定量骨質(zhì)疏松組Osx表達顯著降低,中藥以及運動協(xié)同中藥治療和SHAM、雌激素治療組表達無差異。
　　結論:1.運動聯(lián)合中藥早期干預能對抗去卵巢引起的大鼠骨量丟失,有協(xié)同作用,并能改善骨生物力學性能而不增