大鼠骨質(zhì)疏松模型的建立和放射狀體外沖擊波對大鼠骨質(zhì)疏松模型的干預(yù)的相關(guān)研究.pdf

1、骨質(zhì)疏松癥(osteoporosis，OP)及其所誘發(fā)的骨折是嚴(yán)重危害中老年人類健康的疾病。骨質(zhì)疏松會造成長期的骨丟失和骨微結(jié)構(gòu)的破壞，從而導(dǎo)致骨折的威脅增加。一些藥物已經(jīng)表明能夠降低骨質(zhì)疏松的概率，盡管如此在老年人群中，骨質(zhì)疏松的發(fā)病率依然很高，我們對于骨質(zhì)疏松的新治療需求迫切。有研究表明力學(xué)刺激可以促進骨質(zhì)疏松骨組織中的新骨形成、降低骨丟失，從而治療骨質(zhì)疏松。
　　 體外沖擊波(extracorporealshockwave

2、，ESW)是由電子水壓裝置、電磁裝置等壓力瞬間急劇變化產(chǎn)生的一種機械性脈沖波，經(jīng)沖擊波裝置二次聚焦后這種機械性脈沖就能形成高能量沖擊波，傳播的介質(zhì)可以是固體也可以是液體。在ESW對周圍的組織細(xì)胞作用的實驗中，可以觀察到細(xì)胞外空化效應(yīng)、細(xì)胞膜通透性增加和分子離子化等，除此之外，這樣的作用還能到達原子團、生物分子和細(xì)胞器之間。實驗證明一定量的應(yīng)力刺激能夠有效的促進體內(nèi)、外成骨作用。因而近些年來應(yīng)力化、持續(xù)灌流構(gòu)建的概念多次被學(xué)者在骨組織工程

3、構(gòu)建方式上提出來。作為一種有效的生物力學(xué)刺激，體外沖擊波在治療骨不連、骨折延遲愈合、早期股骨頭缺血性壞死等疾病中取得滿意的效果。它通過機械刺激產(chǎn)生生物力學(xué)效應(yīng)，具有促進細(xì)胞增殖與代謝，刺激微血管再生和增強組織修復(fù)能力的作用。
　　 本實驗擬使用體外沖擊波干預(yù)大鼠的骨質(zhì)疏松模型，觀察體外沖擊波是否能夠改善骨質(zhì)疏松的骨組織的小梁改建，增加局部的骨礦含量。
　　 第一部分雙側(cè)卵巢摘除合并激素注射的大鼠骨質(zhì)疏松模型的建立

4、　　 目的:探究大鼠合并激素注射去勢合并激素注射方法的骨質(zhì)疏松模型的建立，通過對雌性大鼠雙側(cè)卵巢進行摘除并注射甲基強的松龍，2個月后觀察大鼠骨質(zhì)疏松的程度。
　　 方法:將24只3.5月齡雌性SD大鼠隨機分為手術(shù)組（A組）、假手術(shù)組（B組）和去勢+肌注激素組（C組），每組8只大鼠，A、C組大鼠行雙側(cè)卵巢切除術(shù)，C組大鼠同時接受肌注甲基強的松龍。術(shù)前以及術(shù)后1、2月使用雙能X線吸收骨密度測量儀監(jiān)測大鼠骨密度，之后使用micro-

5、CT對離體骨組織進行分析。
　　 結(jié)果:雙能X線骨密度儀測得C組術(shù)后8周腰椎和股骨近端的BMD與術(shù)前相比分別降低8％和8.3％，與B組同期相比較，分別降低14.6％和15.4％，對離體骨進行micro-CT分析后，C組脛骨近端的BMD和BMC較B組分別下降了11.1％和10.5％。C組大鼠的BV/TV均值相比較B組下降了23.2％;C組大鼠Tb.N均值相比較B組下降了22.1％;C組大鼠Tb.Th的均值相比較B組下降28.5％;

6、C組大鼠Tb.Sp均值相比較B組增加了47.8％。
　　 結(jié)論:雙側(cè)卵巢切除+甲基強的松龍肌肉注射法建立SD大鼠骨質(zhì)疏松模型切實可行，造模時間為2個月。
　　 第二部分體外沖擊波對骨質(zhì)疏松大鼠脛骨近端部松質(zhì)骨的影響的實驗研究
　　 目的:在不同時間點（造模成功后的4周、8周和12周）觀察體外沖擊波對骨質(zhì)疏松大鼠脛骨近端部松質(zhì)骨的成骨作用，以及對骨微結(jié)構(gòu)的影響。
　　 方法:選取6月齡的SD骨質(zhì)疏松大鼠32

7、只，造模方法同實驗一。造模成功后立即處死8只大鼠，分離雙側(cè)脛骨，進行各項檢測后作為0周數(shù)據(jù)。其余大鼠給與體外沖擊波干預(yù)，干預(yù)部位覆蓋右側(cè)脛骨，沖擊波能量密度流為0.35mJ/mm2，脈沖為2000次，頻率為3Hz，對側(cè)作為對照組。分別在確定造模成功后4周、8周、12周各處死8只大鼠，分離雙側(cè)脛骨，處死前14、15天皮下注射25mg/kg鹽酸四環(huán)素各一次，于處死前4、5天皮下注射鈣黃綠素5mg/kg各一次。所有大鼠的雙側(cè)脛骨進行micro

8、-CT測量分析，之后雙側(cè)樣本進行脛骨三點彎實驗。在完成三點彎實驗后，做骨組織形態(tài)計量學(xué)分析。得出數(shù)據(jù)，并用統(tǒng)計軟件分析。
　　 結(jié)果:Micro-CT分析表明，在體外沖擊波處理后4周（B組），治療側(cè)（右側(cè)）脛骨的骨小梁體積分?jǐn)?shù)(BV/TV)相對于基線值（0周）下降17％，同樣的數(shù)據(jù)在非治療側(cè)為26％;同樣的數(shù)據(jù)在8周時（C組）分別為23％和34％(p＜0.05);而在12周（D組）時同樣的數(shù)據(jù)為35％和38％。在脛骨三點彎力學(xué)測