2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、目的: 1.探索并設(shè)計一種新型角膜灌流培養(yǎng)系統(tǒng),進而優(yōu)化傳統(tǒng)器官培養(yǎng)保存中角膜的生存環(huán)境,并預(yù)測其在角膜保存中應(yīng)用的可行性。 2.研究此新型培養(yǎng)系統(tǒng)對器官培養(yǎng)保存兔角膜的生存環(huán)境、內(nèi)皮細胞活性的影響,檢驗其在器官培養(yǎng)角膜保存中的應(yīng)用效果。 3.使用本培養(yǎng)系統(tǒng)保存的兔角膜進行穿透性角膜移植(PKP)研究,進一步評價其在長期保存角膜內(nèi)皮細胞(CEC)活性方面的可靠性。 方法: 1.利用制圖軟件設(shè)計一種

2、帶有底座和角膜固定結(jié)構(gòu)的培養(yǎng)裝置,并利用精密蠕動泵組合構(gòu)建角膜灌流培養(yǎng)系統(tǒng)及動物模型。根據(jù)灌流速度不同,隨機將20只兔角膜片分為4組進行灌流培養(yǎng),時間為4周。保存到期后,檢測培養(yǎng)液中pH值、葡萄糖、乳酸、微生物等指標;對各組角膜片行錐藍聯(lián)合茜素紅活性染色計算CEC密度,觀察不同灌流速度對角膜保存效果的影響,篩選最佳的灌流速度。 2.利用新研制的角膜灌流培養(yǎng)系統(tǒng)以及傳統(tǒng)的密閉和定期換液保存3種方式對60只兔角膜進行器官培養(yǎng)保存實驗

3、,每種方法又按保存時間l周、2周、3周、4周分為4個小組,每小組各保存5只角膜,另有2只角膜進行灌流培養(yǎng)保存2月。保存到期后,檢測培養(yǎng)液中pH值、葡萄糖、乳酸、微生物學(xué)等指標;對各組角膜片行錐藍聯(lián)合茜素紅活性染色計算CEC密度、死亡率、六角形細胞百分率;對保存時間最長組角膜行Na+-K+ATP酶及琥珀酸脫氫酶酶組織化學(xué)染色及透射電鏡觀察。 3.新西蘭大白兔15只,其中5只(10只角膜)作為PKP供體,10只作為PKP受體。供體角

4、膜用灌流培養(yǎng)方法進行培養(yǎng)保存,按保存時間4周、8周分為兩組,每小組各保存5只角膜,兩組均行穿透性角膜移植動物實驗。術(shù)后不同時間對所有實驗動物進行大體觀察、裂隙燈檢查、A超角膜測厚。術(shù)后30d處死后,對植片CEC進行錐藍茜素紅聯(lián)合染色檢查。 結(jié)果: 1.實驗室構(gòu)建的動物模型進行灌流培養(yǎng),除流速在5ul/min時,保存前后培養(yǎng)液主要成分變化有顯著性外,其余三組無明顯變化;綜合培養(yǎng)效果及培養(yǎng)液用量考慮,10ul/min的灌流速

5、度相對更加具有優(yōu)勢。 2.不同保存方式間比較顯示,灌流培養(yǎng)能夠提供相對穩(wěn)定的培養(yǎng)環(huán)境,有效地防止污染.經(jīng)灌流培養(yǎng)后的角膜與其他方法保存后的相比擁有更高的CEC密度、更好的酶組織活性以及細胞超微結(jié)構(gòu)。 3.經(jīng)灌流培養(yǎng)保存后的兔角膜行PKP術(shù),術(shù)后觀察各組植片厚度均逐漸減小,術(shù)后30天時植片均透明。植片活性染色均可見較高密度的活性CEC存在。各組PKP術(shù)后的植片透明率、厚度無明顯差異。 結(jié)論: 1.研究結(jié)果表

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