TGF-β通過甲基化誘導(dǎo)TIP30表達(dá)下調(diào)促進(jìn)食管癌轉(zhuǎn)移及EMT機(jī)制的研究.pdf

1、蘇州大學(xué)學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明：所提交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師的指導(dǎo)下，獨(dú)立進(jìn)行研究工作所取得的成果。除文中已經(jīng)注明引用的內(nèi)容外，本論文不含其他個(gè)人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不含為獲得蘇州大學(xué)或其它教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位證書而使用過的材料。對(duì)本文的研究作如重要貢獻(xiàn)的個(gè)人和集體，均已在文中以明確方式標(biāo)明。本人承擔(dān)本聲明的法律責(zé)任。論文作者簽名：弳嘩日TGFp通過甲基化誘導(dǎo)TIP30表達(dá)下調(diào)促進(jìn)食管癌轉(zhuǎn)移及EMT機(jī)制的研究中文摘要中

2、文摘要我國(guó)是食管癌高發(fā)國(guó)家之一，其發(fā)生率和死亡率都很高。腫瘤轉(zhuǎn)移和復(fù)發(fā)是食管癌預(yù)后差的主要原因之一。近來(lái)，上皮細(xì)胞間質(zhì)轉(zhuǎn)化EMT在腫瘤轉(zhuǎn)移中的作用成為研究的熱點(diǎn)。TIP30／CC3基因是一個(gè)腫瘤轉(zhuǎn)移抑制基因，前期研究發(fā)現(xiàn)TIP30作為抑癌基因，在肝癌、前列腺癌、乳腺癌、胃癌等惡性腫瘤中發(fā)揮抑制腫瘤生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移的作用。但TIP30在食管癌中尚無(wú)研究，且TIP30抑制轉(zhuǎn)移的機(jī)制及其對(duì)EMT的影響有待進(jìn)一步闡明。本課題以食管癌為模型闡明了TIP

3、30抑制食管鱗癌浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移和EMT的作用及其相關(guān)分子機(jī)制。本課題共分為四個(gè)部分：一、TIP30抑制食管鱗癌轉(zhuǎn)移的體內(nèi)和體外研究分析11株食管鱗癌細(xì)胞系和1株食管正常上皮永生化細(xì)胞系中TIP30基因的表達(dá)水平；利用慢病毒為載體的RNA干擾技術(shù)(LvshTIP30)抑制TIP30基因的表達(dá)，同時(shí)構(gòu)建了TIP30的慢病毒過表達(dá)系統(tǒng)(LvAcTIP30)增加TIP30的表達(dá)，然后通過軟瓊脂克隆形成實(shí)驗(yàn)、四甲基偶氮唑鹽改良實(shí)驗(yàn)(MTS)、平板克隆形

4、成實(shí)驗(yàn)以及裸鼠體內(nèi)成瘤實(shí)驗(yàn)檢測(cè)了TIP30表達(dá)對(duì)食管鱗癌生長(zhǎng)的影響，通過Transwell遷移實(shí)驗(yàn)和劃痕實(shí)驗(yàn)及裸鼠體內(nèi)成瘤轉(zhuǎn)移實(shí)驗(yàn)檢測(cè)了TIP30表達(dá)對(duì)食管鱗癌轉(zhuǎn)移能力的影響。實(shí)驗(yàn)結(jié)果：干擾TIP30基因的表達(dá)，食管鱗癌細(xì)胞的體外增殖、轉(zhuǎn)移和侵襲能力增強(qiáng)，實(shí)驗(yàn)組裸鼠與對(duì)照組相比成瘤體積明顯增大，肺轉(zhuǎn)移灶增多；過表達(dá)TIP30基因后實(shí)驗(yàn)結(jié)果反之。二、TGF—D誘導(dǎo)TIP30啟動(dòng)子區(qū)甲基化沉默TIP30表達(dá)通過TGFB刺激細(xì)胞誘導(dǎo)食管癌細(xì)胞