趨化因子受體CXCR3,CCR5,CCR3在免疫性血小板減少癥患者脾臟中的表達(dá).pdf

1、背景與目的:免疫性血小板減少癥（immune thrombocytopenia, ITP）是一種以外周血中血小板減少為特征的獲得性自身免疫紊亂性疾病，血小板生成受損及T淋巴細(xì)胞亞群失衡介導(dǎo)的免疫紊亂在其復(fù)雜的發(fā)病機制中起著重要的作用。輔助性T(Th)細(xì)胞的缺陷致使自身反應(yīng)性B細(xì)胞活化并分泌IgG型抗血小板自身抗體，最終導(dǎo)致血小板在單核-巨噬細(xì)胞系統(tǒng)中被破壞。其中，脾臟作為人體最大的淋巴器官，是自身反應(yīng)性B細(xì)胞活化，抗血小板自身抗體產(chǎn)生以

2、及血小板破壞的主要場所，脾切除術(shù)是目前治療慢性ITP的有效措施，其有效率為66％左右。現(xiàn)有研究證明，慢性ITP是一種以Th細(xì)胞異常聚集為特征的Th1優(yōu)勢性疾病。Th1型趨化因子受體CXCR3，CCR5以及Th2型趨化因子受體CCR3在系統(tǒng)性紅斑狼瘡及類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎等自身免疫性疾病中的表達(dá)已有研究，證實在Th1優(yōu)勢性疾病中Th1型趨化因子受體表達(dá)增多。初步研究表明在ITP患者外周血中也存在著趨化因子受體表達(dá)的異常，但I(xiàn)TP患者脾臟中趨化因

3、子受體CXCR3，CCR5及CCR3的表達(dá)情況卻鮮有報道。
　　 本研究旨在觀察ITP脾臟的病理學(xué)形態(tài)特征，用免疫組化、蛋白印跡及實時熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(real-time PCR，RT-PCR)檢測ITP患者脾臟中Th1型趨化因子受體CXCR3，CCR5以及Th2型趨化因子受體CCR3蛋白及基因水平的表達(dá)情況及其臨床意義。
　　 方法：收集24例ITP患者的脾臟標(biāo)本作為病例組，18例創(chuàng)傷性脾破裂患者脾切除的脾臟標(biāo)本

4、作為對照組。通過HE染色法來觀察ITP脾臟的病理學(xué)形態(tài)。用免疫組化SP法檢測CXCR3，CCR5及CCR3在ITP患者脾臟中的陽性表達(dá)率，分別用western blot法和RT-PCR法檢測CXCR3，CCR5及CCR3在ITP患者脾臟中的蛋白和mRNA表達(dá)水平。
　　 結(jié)果：ITP患者脾臟的形態(tài)學(xué)特征表現(xiàn)為白髓濾泡反應(yīng)性增生，生發(fā)中心擴大，濾泡邊緣帶增厚，中央動脈管壁增厚、纖維化，毛細(xì)血管密度增加。脾竇擴張、淤血，紅髓中可見中

5、性粒細(xì)胞的浸潤，脾索可見吞噬紅細(xì)胞和血小板的巨噬細(xì)胞浸潤。ITP患者脾臟中Th1型趨化因子受體CXCR3和CCR5的陽性率為(90％、100％)均高于對照組(75％、87.5％)（P值均＜0.05），Th2型趨化因子受體CCR3陽性率為50％，低于對照組(62.5％)(P＜0.05);Western blot結(jié)果顯示ITP患者脾臟中CXCR3和CCR5表達(dá)增多，CCR3表達(dá)減少;同時，CXCR3和CCR5 mRNA水平表達(dá)增多，CCR3