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1、 目的:通過動(dòng)態(tài)的方法觀察卵圓細(xì)胞的主要生物學(xué)特征及其在肝癌發(fā)生過程中的演變規(guī)律,方法:實(shí)驗(yàn)通過構(gòu)建實(shí)驗(yàn)性肝癌模型和卵圓細(xì)胞株連續(xù)傳代的方法建立動(dòng)態(tài)的觀察體系,運(yùn)用常規(guī)HE染色、免疫組織/細(xì)胞化學(xué)、酶細(xì)胞化學(xué)、粘液染色和RT-PCR等技術(shù),揭示卵圓細(xì)胞在肝癌發(fā)生過程中以及在連續(xù)傳代過程中的演變規(guī)律和分子表達(dá)特征。結(jié)果:1)實(shí)驗(yàn)性肝癌模型不同階段有著不同的形態(tài)特征。隨著誘癌時(shí)間的延長(zhǎng),逐漸出現(xiàn)卵圓細(xì)胞增生,到第14周時(shí)達(dá)高峰,并出現(xiàn)癌前
2、病變和膽管細(xì)胞癌;之后增生的卵圓細(xì)胞逐漸減少,而癌灶不斷擴(kuò)大,到第24周時(shí)形成大片的混合性肝癌。2)OV-6標(biāo)識(shí)出卵圓細(xì)胞在實(shí)驗(yàn)性肝癌模型中的行蹤。3)卵圓細(xì)胞表達(dá)OV-6、AFP、c-kit、GGT、GST-P、M2-PK等標(biāo)志,而不表達(dá)成熟肝細(xì)胞標(biāo)志L-PK、Albumin。結(jié)論:1)以3,-Me-DAB為誘癌劑構(gòu)建的實(shí)驗(yàn)性肝癌動(dòng)物模型,很好的模擬了從卵圓細(xì)胞增生到肝癌發(fā)生、發(fā)展的自然進(jìn)程,形態(tài)學(xué)特征明顯,有助于癌變過程的動(dòng)態(tài)研究。
3、2)以O(shè)V-6作為卵圓細(xì)胞的示蹤標(biāo)記,很直觀地說明了卵圓細(xì)胞出現(xiàn)、增生及演變規(guī)律,與實(shí)驗(yàn)性肝癌發(fā)生的過程相吻合,提示肝癌的發(fā)生與卵圓細(xì)胞的異常分化有關(guān)。3)GST-P和M2-PK在卵圓細(xì)胞株OC3各代內(nèi)的表達(dá)與骨髓干細(xì)胞向肝細(xì)胞誘導(dǎo)分化的中間階段(幼稚肝細(xì)胞階段)的分子表達(dá)特征極為相似,加上肝癌動(dòng)物模型中c-Kit的陽性表達(dá),均提示卵圓細(xì)胞和骨髓干細(xì)胞之間可能存在某種淵源聯(lián)系。4)卵圓細(xì)胞同時(shí)表達(dá)AFP和GGT,兼肝細(xì)胞和膽管上皮細(xì)胞的
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