內(nèi)皮抑素對(duì)膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖的影響研究.pdf

1、腦膠質(zhì)瘤來源于神經(jīng)上皮，是顱內(nèi)最常見的原發(fā)性腫瘤，具有發(fā)病率高、復(fù)發(fā)率高、死亡率高和治愈率低的特點(diǎn)。目前技術(shù)條件下，腦膠質(zhì)瘤特別是惡性程度高的腦膠質(zhì)瘤的預(yù)后還很不理想。而腫瘤的抗血管生成治療越來越引起人們的普遍關(guān)注，抗血管生成治療是通過抑制血管的生成而阻斷腫瘤細(xì)胞獲得營(yíng)養(yǎng)，從而達(dá)到有效抑制腫瘤生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移的目的。重組人血管內(nèi)皮抑素（下文簡(jiǎn)稱內(nèi)皮抑素，endostatin）是目前臨床效果比較好的一種抗腫瘤藥，臨床上主要用于初治或復(fù)治的Ⅲ/Ⅳ

2、期非小細(xì)胞肺癌的治療，但是對(duì)腦膠質(zhì)瘤的治療效果怎么樣，目前還不是很清楚。故本實(shí)驗(yàn)擬通過研究?jī)?nèi)皮抑素對(duì)體外培養(yǎng)的神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞株增殖作用及VEGF和核仁素表達(dá)的影響，進(jìn)一步為腦神經(jīng)膠質(zhì)瘤的臨床治療提供新的途徑和理論依據(jù)。
　　 第一部分，內(nèi)皮抑素對(duì)膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖的抑制作用
　　 目的：研究?jī)?nèi)皮抑素對(duì)神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞株U251和C6增殖及遷移是否有抑制作用，并探討它對(duì)神經(jīng)膠質(zhì)瘤的治療及意義。
　　 方法：體外培養(yǎng)神經(jīng)膠

3、質(zhì)瘤細(xì)胞株U251和C6，不同濃度內(nèi)皮抑素(10、20、30、40、50μg/ml)分別處理細(xì)胞48h，MTT法檢測(cè)不同濃度內(nèi)皮抑素對(duì)U251和C6的增殖作用的影響；20μg/ml內(nèi)皮抑素作用細(xì)胞24、48h后，觀察對(duì)細(xì)胞遷移作用的影響及細(xì)胞的形態(tài)學(xué)變化。
　　 結(jié)果：不同濃度內(nèi)皮抑素對(duì)U251和C6細(xì)胞的增殖均有不同程度的抑制作用并有濃度依賴性，最后選取20μg/ml作為內(nèi)皮抑素后續(xù)的實(shí)驗(yàn)濃度。另外，內(nèi)皮抑素對(duì)U251和C6細(xì)

4、胞的遷移能力也有顯著抑制作用。
　　 結(jié)論：內(nèi)皮抑素對(duì)體外培養(yǎng)的神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞株的增殖及遷移均有抑制作用。
　　 第二部分，內(nèi)皮抑素對(duì)膠質(zhì)瘤細(xì)胞VEGF和核仁素表達(dá)變化的影響
　　 目的：研究?jī)?nèi)皮抑素對(duì)U251和C6細(xì)胞中VEGF及核仁素表達(dá)變化，從而為內(nèi)皮抑素對(duì)腫瘤的臨床治療提供實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)和科學(xué)的理論依據(jù)。
　　 方法：用免疫熒光標(biāo)記檢測(cè)U251和C6細(xì)胞中VEGF和核仁素蛋白表達(dá)以及20μg/ml內(nèi)皮抑

5、素分別處理U251和C6細(xì)胞24h和48h時(shí)VEGF表達(dá)變化；Western blot檢測(cè)兩種細(xì)胞在內(nèi)皮抑素處理不同時(shí)間核仁素蛋白表達(dá)變化。
　　 結(jié)果：VEGF在兩種細(xì)胞中都高表達(dá)，主要分布在包漿中；核仁素在兩種細(xì)胞中也都有表達(dá)，主要表達(dá)在細(xì)胞核中，少量表達(dá)在胞漿和細(xì)胞膜上。內(nèi)皮抑素可以下調(diào)U251和C6細(xì)胞中VRGF表達(dá)；而核仁素的表達(dá)則呈現(xiàn)先減少后增多的趨勢(shì)。
　　 結(jié)論：在體外內(nèi)皮抑素可以下調(diào)膠質(zhì)瘤細(xì)胞VEGF表