Rak對(duì)人腦膠質(zhì)瘤U251細(xì)胞凋亡和增殖的影響.pdf

1、目的:檢測(cè)Rak在正常腦組織及膠質(zhì)瘤組織中的表達(dá);探討Rak對(duì)膠質(zhì)瘤U251細(xì)胞凋亡及增殖能力的影響。
　　 方法:
　　 ①用反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)法(RT-PCR)檢測(cè)Rak在正常腦組織及不同惡性程度腦膠質(zhì)瘤中的表達(dá)情況。
　　 ②通過(guò)Lipofectamine2000將pcDNA3.0-Rak質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到膠質(zhì)瘤U251細(xì)胞。實(shí)驗(yàn)分為空載體對(duì)照組(轉(zhuǎn)染pcDNA3.0)和Rak過(guò)表達(dá)組(轉(zhuǎn)染pcDNA3.0-Rak

2、)。
　　 ③運(yùn)用細(xì)胞免疫熒光、RT-PCR、蛋白免疫印跡等方法鑒定外源性的Rak在細(xì)胞中的表達(dá)情況。④分別以流式細(xì)胞術(shù)和MTT比色法檢測(cè)Rak對(duì)細(xì)胞凋亡率及增殖能力的影響。
　　 結(jié)果:
　　 ①RT-PCR結(jié)果顯示,與正常腦組織相比,Rak在膠質(zhì)瘤組織中呈低表達(dá)(P＜0.05)。
　　 ②細(xì)胞免疫熒光檢測(cè)顯示,轉(zhuǎn)染細(xì)胞48 h后,Rak轉(zhuǎn)染率達(dá)到70％左右;與空載體對(duì)照組相比,過(guò)表達(dá)組細(xì)胞Rak基因m