高血壓腦出血肝陽化風證患者血清雙向凝膠電泳圖譜建立及質(zhì)譜分析.pdf

1、目的 利用雙向聚丙烯酰胺凝膠電泳技術(shù)分離高血壓腦出血肝陽化風證、高血壓病肝陽上亢證及健康對照血清總蛋白，建立高血壓腦出血肝陽化風證、高血壓病肝陽上亢證及健康對照血清蛋白質(zhì)組表達圖譜。比較3組血清蛋白質(zhì)組的差異表達，對差異表達的蛋白質(zhì)進行質(zhì)譜分析和數(shù)據(jù)庫搜索，初步確定高血壓腦出血肝陽化風證血清中差異表達的蛋白質(zhì)，為進一步闡明中醫(yī)肝陽化風證的本質(zhì)奠定基礎(chǔ)。 方法 高血壓腦出血肝陽化風證組、高血壓病肝陽上亢證組及健康對照組血清均以試劑

2、盒去除白蛋白及IgG，以BCA法測血清蛋白濃度。以雙向凝膠電泳分離各組血清蛋白質(zhì)，考馬斯亮藍染色使凝膠中的蛋白質(zhì)點可視化。掃描凝膠成像，以PDQuest軟件對高血壓腦出血肝陽化風證、高血壓病肝陽上亢證及健康對照血清蛋白質(zhì)組表達圖譜進行差異分析，選定差異點進行MALDI-TOF質(zhì)譜分析。Mascot 軟件搜索 MSDB 和SMISS-PROT數(shù)據(jù)庫鑒定蛋白質(zhì)。 結(jié)果 1．建立高血壓腦出血肝陽化風證、高血壓病肝陽上亢證及健康

3、對照血清蛋白質(zhì)組表達圖譜。 2.發(fā)現(xiàn)8個蛋白質(zhì)點在高血壓腦出血肝陽化風證血清中出現(xiàn)異常表達，7個蛋白質(zhì)點在高血壓病肝陽上亢證血清中出現(xiàn)異常表達。初步鑒定其中的5個蛋白質(zhì)：血清淀粉樣前體蛋白(serum amyloidprotein precursor)，銅藍蛋白(ceruloplasmin)，維生素D結(jié)合蛋白(Ⅵtamin D-Binding Protein)，載脂蛋白C-Ⅲ(apolipoprotein C-Ⅲ)和轉(zhuǎn)鐵蛋白(t