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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:
通過(guò)對(duì)目前國(guó)際熱點(diǎn)的植物DNA條形碼候選序列(ITS2、psbA-trnH、rbcL和matK)進(jìn)行比較和評(píng)價(jià),試圖篩選出適合唇形科、百合科、蕓香科、薔薇科和菊科藥用植物鑒定的DNA條形碼序列。
方法:
以廣州中醫(yī)藥大學(xué)藥王山嶺南常用中草藥為材料,利用試劑盒法提取唇形科、百合科、蕓香科、薔薇科和菊科共76種藥用植物的基因組DNA,使用ITS2、psbA-trnH、rbcL和matK序列的通用引物進(jìn)行
2、PCR和雙向測(cè)序,通過(guò)比較各序列的擴(kuò)增和測(cè)序成功率、種內(nèi)和種間的差異以及系統(tǒng)發(fā)育樹等指標(biāo)來(lái)評(píng)價(jià)不同候選序列的鑒定能力。
結(jié)果:
對(duì)唇形科20個(gè)種60個(gè)樣本的分析發(fā)現(xiàn),ITS2、psbA-trnH、rbcL、matK四個(gè)候選序列的擴(kuò)增和測(cè)序成功率均為100%。ITS2序列的變異位點(diǎn)數(shù)最多(69.3%),在系統(tǒng)發(fā)育樹方面,ITS2的鑒定成功率為70%、psbA-tmH的鑒定成功率為55%、rbcL的鑒定成功率為45%、m
3、atK的鑒定成功率為75%。
對(duì)百合科16個(gè)種45個(gè)樣本的分析發(fā)現(xiàn),ITS2、psbA-trnH、rbcL、matK四個(gè)候選序列的擴(kuò)增和測(cè)序成功率均為100%。ITS2序列的變異位點(diǎn)數(shù)最多(89.1%),在系統(tǒng)發(fā)育樹方面,ITS2的鑒定成功率為87.5%、psbA-trnH的鑒定成功率為62.5%、rbcL的鑒定成功率為68.8%、matK的鑒定成功率為68.8%。
對(duì)蕓香科16個(gè)種32個(gè)樣本的分析發(fā)現(xiàn),ITS2、p
4、sbA-trnH、rbcL、matK四個(gè)候選序列的擴(kuò)增和測(cè)序成功率均為100%。psbA-trnH序列的變異位點(diǎn)數(shù)最多(64.7%),在系統(tǒng)發(fā)育樹方面,ITS2的鑒定成功率為81.3%、psbA-trnH的鑒定成功率為81.3%、rbcL的鑒定成功率為68.8%、matK的鑒定成功率為75%。
對(duì)薔薇科11個(gè)種28個(gè)樣本的分析發(fā)現(xiàn),ITS2、psbA-trnH、rbcL、matK四個(gè)候選序列的擴(kuò)增和測(cè)序成功率均為100%。ma
5、tK序列的變異位點(diǎn)數(shù)最多(59.5%),在系統(tǒng)發(fā)育樹方面,ITS2的鑒定成功率為100%、psbA-trnH的鑒定成功率為81.8%、rbcL的鑒定成功率為63.6%、matK的鑒定成功率為81.8%。
對(duì)菊科13個(gè)種39個(gè)樣本的分析發(fā)現(xiàn),ITS2、psbA-trnH、rbcL、matK四個(gè)候選序列的擴(kuò)增和測(cè)序成功率均為100%。ITS2序列的變異位點(diǎn)數(shù)最多(71.7%),在系統(tǒng)發(fā)育樹方面,ITS2的鑒定成功率為100%、ps
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