MiR-7可以通過對EGFR及IGF1R信號通路的抑制來加強吉非替尼對非小細(xì)胞肺癌的細(xì)胞毒性.pdf

1、目的：
　　 探索上調(diào)肺腺癌A549細(xì)胞中miR-7的表達(dá)水平能否增強吉非替尼對非小細(xì)胞肺癌的細(xì)胞毒性，觀察細(xì)胞增殖率的變化及吉非替尼IC50等的變化，并探索導(dǎo)致這種結(jié)果的機制。
　　 方法：
　　 使用lipofectamine2000攜帶miR-7對A549細(xì)胞進行瞬時轉(zhuǎn)染，轉(zhuǎn)染后將細(xì)胞分為48小時組和72小時組，并與吉非替尼共同作用。qRT-PCR測定轉(zhuǎn)染后細(xì)胞內(nèi)miR-7表達(dá)水平。MTT檢測各組細(xì)胞增殖率

2、變化，并計算吉非替尼IC50變化。Westernblot檢測Raf1、PI3K、ERK、Akt、p-ERK、p-Akt蛋白表達(dá)的變化。
　　 結(jié)果：
　　 在A549細(xì)胞中上調(diào)miR-7的表達(dá)水平后與吉非替尼共同作用較吉非替尼單獨作用對非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞的抑制更加顯著。上調(diào)miR-7表達(dá)水平后，吉非替尼的IC50減少。MiR-7與吉非替尼共同作用使EGFR/Raf1/ERK及IGF1R/PI3K/Akt信號通路的蛋白的表達(dá)