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文檔簡介
1、目的:研究宮內(nèi)感染致新生大鼠腦損傷的病理及生化改變,并對(duì)腦損傷大鼠進(jìn)行神經(jīng)行為學(xué)檢測(cè)以鑒定腦性癱瘓。 方法:1.動(dòng)物模型制備:給予37只孕第18、19天的脂多糖(LPS)組大鼠LPS500μg/kg·d,連續(xù)兩天腹腔注射,10只生理鹽水組孕鼠腹腔注射同劑量的生理鹽水。孕22天前分娩的仔鼠為早產(chǎn)仔鼠。觀察兩組孕鼠的分娩時(shí)間及新生仔鼠的出生體重。兩組均去除早產(chǎn)仔鼠。仔鼠出生后,將LPS組和生理鹽水組母鼠處死,取子宮和胎盤做HE染色觀
2、察宮內(nèi)感染情況,判斷標(biāo)準(zhǔn)為大量中性粒細(xì)胞浸潤。隨機(jī)選取生理鹽水組和LPS組仔鼠各80只,分為7日齡生理鹽水仔鼠組A1(n=20),7日齡LPS仔鼠組B1(n=20),25日齡生理鹽水仔鼠組A2(n=60),25日齡LPS仔鼠組B2(n=60)。2.病理及生化檢測(cè):將A1和B1組仔鼠斷頭取腦,應(yīng)用免疫組化方法進(jìn)行腦組織髓鞘堿性蛋白(MBP)、S-100蛋白陽性細(xì)胞檢測(cè);取腦組織皮質(zhì)、海馬、內(nèi)囊、胼胝體進(jìn)行電鏡觀察;用酶聯(lián)免疫法測(cè)定血液和腦
3、組織中MBP、S-100蛋白含量。3.行為學(xué)檢測(cè)及腦性癱瘓鼠鑒定:對(duì)A2和B2組仔鼠進(jìn)行隨意運(yùn)動(dòng)、姿勢(shì)、肌張力、不自主運(yùn)動(dòng)、情感行為能力、傾斜板試驗(yàn)等檢測(cè),記錄各項(xiàng)評(píng)分并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。鑒定為腦性癱瘓的大鼠,必須同時(shí)具備神經(jīng)行為學(xué)檢查中隨意運(yùn)動(dòng)障礙、姿勢(shì)異常、肌張力異常;伴有或不伴有不自主運(yùn)動(dòng)、情感行為能力異常;傾斜板試驗(yàn)必須有一項(xiàng)陽性。 結(jié)果:1.LPS組中有10只孕鼠分娩前死亡,9只孕鼠提前分娩,其余18只孕鼠共娩出活產(chǎn)足月
4、仔鼠107只,死產(chǎn)足月仔鼠66只;生理鹽水組孕鼠均順利生產(chǎn),孕鼠無死亡及提前分娩,共娩出活產(chǎn)足月仔鼠96只;與生理鹽水組仔鼠相比LPS組仔鼠出生時(shí)皮膚顏色青紫、活動(dòng)少、體重低;LPS組子宮及胎盤病理檢測(cè)見子宮壁及胎盤內(nèi)血管充血、水腫,并見大量中性粒細(xì)胞浸潤。2.腦組織免疫組化顯示:與A1組相比,B1組腦組織各部位(內(nèi)囊、海馬、皮質(zhì)、胼胝體)MBP陽性染色均減少和減弱(P<0.01);B1組腦組織各部位(內(nèi)囊、海馬、皮質(zhì)、胼胝體)S-10
5、0蛋白陽性染色較A1組均增多和增強(qiáng)(P<0.01);3.腦組織電鏡顯示:B1組腦組織表現(xiàn)出神經(jīng)元胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)大量的脂褐素顆粒,尼氏體減少,神經(jīng)纖維纏繞,突觸膜融合,突觸小泡消失,軸突溶解,線粒體空泡變性,髓鞘板層結(jié)構(gòu)松散、崩解,髓鞘數(shù)量減少,膠質(zhì)細(xì)胞增多等表現(xiàn)。4.血液、腦組織中MBP、S-100蛋白含量:B1組血液中MBP、S-100蛋白含量均高于A1組(P<0.01);B1組腦組織中MBP含量低于A1組(P<0.01),S-100蛋白
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