早期豐富環(huán)境對宮內(nèi)感染致腦損傷仔鼠NSCs的影響.pdf

1、目的：研究豐富環(huán)境刺激對宮內(nèi)感染致腦損傷大鼠內(nèi)源性神經(jīng)干細(xì)胞的影響。 方法：1、腦損傷動物模型的制備：采用我院宮內(nèi)感染致新生大鼠腦損傷成功模型，給30只孕第17天的LPS組孕鼠連續(xù)兩天腹腔注射脂多糖(LPS，血清型055:B5，Sigma公司，溶于1ml生理鹽水)450μg/kg.d，而生理鹽水組孕鼠腹腔注射同劑量的生理鹽水。孕22天前分娩的仔鼠為早產(chǎn)鼠。兩組均去除早產(chǎn)鼠，對子宮及胎盤病理檢測。隨機(jī)選取LPS組仔鼠分為訓(xùn)練組T(

2、30只)，對照組I(30只)，生理鹽水組N(30只)。三組大鼠恒溫恒濕，母乳喂養(yǎng)。2、早期豐富環(huán)境刺激：出生后1日齡訓(xùn)練組仔鼠給予連續(xù)7天早期觸摸，從第8日起給予連續(xù)21天豐富環(huán)境刺激，損傷組、生理鹽水組常規(guī)飼養(yǎng)。3、內(nèi)源性神經(jīng)干細(xì)胞檢測：隨機(jī)選取1日齡、3日齡、7日齡、14日齡、28日齡各組仔鼠用免疫組織化學(xué)方法動態(tài)檢測海馬齒狀回顆粒層(SGZ)；5-溴脫氧尿苷嘧啶(BrdU)，多唾液酸神經(jīng)細(xì)胞黏附分子(PSA-NCAM)陽性細(xì)胞的表

3、達(dá)。BrdU確定神經(jīng)干細(xì)胞的增殖，PSA-NCAM確定神經(jīng)干細(xì)胞的可塑性。 結(jié)果：1、LPS組30只孕鼠腹腔注射后，5只死亡，3只提前分娩，其余22只順利生產(chǎn)，共娩出足月活產(chǎn)仔鼠76只、死產(chǎn)仔鼠24只：生理鹽水組6只孕鼠共娩出活產(chǎn)足月仔鼠47只，無死產(chǎn)仔鼠。2、LPS組子宮及胎盤病理檢測見子宮壁及胎盤內(nèi)血管充血、水腫，并見大量中性粒細(xì)胞浸潤。3、腦組織免疫組化結(jié)果：①生理鹽水組，訓(xùn)練組，損傷組新生大鼠SGZ區(qū)均存在BrdU及PS

4、A-NCAM陽性細(xì)胞，生理鹽水組顯著高于訓(xùn)練組，損傷組(P＜0.01)。②生理鹽水組BrdU及PSA-NCAM陽性細(xì)胞數(shù)出生3日齡開始增加(P＜0.05)，7日齡達(dá)到高峰，14日后下降，28日接近正常成年大鼠水平。⑨早期豐富環(huán)境刺激后，訓(xùn)練組大鼠SGZ區(qū)BrdU及PSA-NCAM陽性細(xì)胞數(shù)在干預(yù)后3日齡開始增加(P＜0.05)，14日齡達(dá)高峰，峰值顯著高于生理鹽水組水平(P＜0.01)，28日后下降，但仍高于生理鹽水組，BrdU及PSA