孕鼠感染犬弓首線蟲后對仔鼠的影響.pdf

1、目的:1、通過不同劑量感染期犬弓首線蟲蟲卵感染妊娠早期昆明小鼠，檢測仔鼠血清細(xì)胞因子（IL-2，IL-4，IL-10，IFN-r），從而了解妊娠早期感染犬弓線蟲是否對仔鼠產(chǎn)生保護(hù)作用。2、探討妊娠早期感染犬弓首線蟲蟲卵后仔鼠行為學(xué)改變及腦組織病理學(xué)變化，是否與感染劑量呈相關(guān)性。3、綜合實(shí)驗(yàn)結(jié)果為犬弓首線蟲幼蟲移行癥的孕期保健和免疫防治提供一定的臨床依據(jù)。
　　方法:1、犬弓首線蟲標(biāo)本采集及感染期蟲卵的制備。2、實(shí)驗(yàn)動物模型的建立:

2、把雄鼠和雌鼠以1∶2比例配對合籠，將確定受孕成功的雌鼠隨機(jī)分為對照組(A)、低劑量感染組(B)、高劑量感染組(C)3個組:對照組(A)每只灌胃等量生理鹽水;低劑量感染組(B)每只灌胃1×103個犬弓首線蟲感染期蟲卵;高劑量感染組(C)每只灌胃3×103個犬弓首線蟲感染期蟲卵。在仔鼠6周齡時，從A、B、C各組隨機(jī)挑選80只，其中40只攻擊感染灌胃0.5×103個犬弓首線蟲感染期蟲卵，另外40只仔鼠灌胃等量生理鹽水。實(shí)驗(yàn)共分6組:A1（A組

3、仔鼠灌胃生理鹽水）、A2（A組仔鼠灌胃0.5×103蟲卵）、B1（B組仔鼠灌胃生理鹽水）、B2（B組仔鼠灌胃0.5×103蟲卵)、C1（C組仔鼠灌胃生理鹽水）、C2（C組仔鼠灌胃0.5×103蟲卵）。2、細(xì)胞因子檢測:在仔鼠攻擊感染后第7、14、28、56天，定期隨機(jī)在6組中各取7只仔鼠常規(guī)內(nèi)眥靜脈取血，收集血清，用間接ELISA檢測血清細(xì)胞因子（IL-2，IL-4，IL-10，IFN-r）的含量。3、行為學(xué)檢測:在仔鼠長到15周齡，從

4、6組中隨機(jī)各取10只檢測爬行能力、抓握能力、鼠尾協(xié)助平衡能力;對熱刺激的逃避反應(yīng);從迷宮入口至出口所需時間。實(shí)驗(yàn)完畢后處死參與行為學(xué)檢查的仔鼠，做稀鹽酸幼蟲分離，觀察腦內(nèi)幼蟲數(shù)量。4、病理學(xué)檢查:仔鼠8周齡時在各組中隨機(jī)處死5只，解剖后取腦組織，制作常規(guī)HE染色石蠟切片，觀察各組之間的病理學(xué)變化。
　　結(jié)果:1、①各組仔鼠血清細(xì)胞因子（IL-2、IL-4、IL-10、IFN-r）含量，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。②A2、B

5、2、C2組血清中IL-2、IL-4、IL-10、IFN-r含量高于A1、B1、C1組仔鼠血清細(xì)胞因子的含量，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。③各細(xì)胞因子之間變化規(guī)律不同:Th1細(xì)胞產(chǎn)生的細(xì)胞因子IL-2在感染早期呈上升趨勢，在感染后4周時達(dá)到高峰，以后逐漸下降;IFN-r在感染早期呈上升趨勢，在感染后第2周達(dá)到高峰以后逐漸下降。Th2細(xì)胞產(chǎn)生的細(xì)胞因子IL-4和IL-10攻擊感染后呈下降趨勢，且下降趨勢在感染早期下降明顯，感染后期逐

6、漸放緩。2、各組仔鼠行為學(xué)檢測結(jié)果差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)，在A2、B2、C2組中B2組成績最好，B1成績好于C1組。3、經(jīng)過稀鹽酸幼蟲分離法，分離出的幼蟲數(shù)量與行為學(xué)表現(xiàn)呈負(fù)相關(guān)。4、腦組織病理切片:幼蟲與周圍腦組織有間隙，蟲體周圍的腦細(xì)胞受壓變扁，有少量膠質(zhì)細(xì)胞增生和腦細(xì)胞變性，但蟲體周圍腦組織炎癥反應(yīng)不明顯。
　　結(jié)論:1、妊娠早期感染孕鼠會對仔鼠產(chǎn)生免疫調(diào)節(jié)作用，且可誘導(dǎo)仔鼠面對后天加強(qiáng)感染時產(chǎn)生明顯保護(hù)性免疫記