EPO對宮內(nèi)感染腦白質(zhì)損傷早產(chǎn)大鼠腦組織CD68、GFAP水平和神經(jīng)行為學的影響.pdf

1、目的:通過檢測腦組織內(nèi)CD68、神經(jīng)膠質(zhì)原纖維酸性蛋白(GFAP)水平的變化及評估神經(jīng)行為學研究重組促紅細胞生成素(rhEPO)對宮內(nèi)感染導致腦白質(zhì)損傷早產(chǎn)鼠的神經(jīng)保護作用。
　　方法:選取20只孕15天的Wistar大鼠，按3∶1比例隨機分為感染組(n=15)和對照組(n=5)，兩組分別于孕15天腹腔注射脂多糖(LPS0.3mg/Kg)及等量的無菌生理鹽水，于孕21天行剖宮產(chǎn)術(shù)取出胎鼠。兩組分別隨機取胎盤(n=10)和新生鼠腦組

2、織(n=10)予蘇木素-伊紅染色觀察病理變化。同時隨機選取對照組中新生鼠40只為早產(chǎn)對照組;選取感染組中新生鼠80只，隨機分為EPO治療組(n=40)和感染對照組(n=40)。EPO治療組于生后即刻腹腔注射rhEPO(5000IU/Kg)，早產(chǎn)對照組及感染對照組同時腹腔注射等量生理鹽水。三組新生大鼠均分別于生后1天、3天、7天各取10只仔鼠行甲醛灌注取腦，利用免疫熒光染色檢測腦組織中CD68和GFAP的水平;三組均于生后30天，各取10

3、只仔鼠利用曠場試驗、懸吊試驗、斜坡試驗、拒俘反應(yīng)試驗進行神經(jīng)行為學觀察。
　　結(jié)果:1.感染組孕鼠的胎盤血管充血、水腫，并可見大量中性粒細胞浸潤。感染組中新生鼠的腦白質(zhì)染色淡、結(jié)構(gòu)疏松;神經(jīng)纖維粗細不均，走向紊亂，可見核小、體積小、深染及少突起的欠分化神經(jīng)元;膠質(zhì)細胞數(shù)量增多，可見細胞核固縮、胞漿疏松、細胞皺縮等凋亡改變。
　　2.三組新生1日齡大鼠腦組織未見明顯CD68、GFAP陽性染色;感染對照組及EPO治療組兩組3日齡

4、、7日齡大鼠腦組織中CD68、GFAP水平較早產(chǎn)對照組均顯著上升，各組間差異均具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05); EPO治療組3日齡、7日齡大鼠腦組織的CD68、6FAP水平較感染對照組均顯著下降，差異具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。EPO治療組7日齡大鼠腦組織的CD68、GFAP較3日齡的水平顯著下降，感染對照組7日齡大鼠腦組織的CD68、GFAP較3日齡的水平有所上升，差異均具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。
　　3.神經(jīng)行為測試

5、:感染對照組30日齡的大鼠神經(jīng)行為學評分顯著低于早產(chǎn)對照組;EPO治療組的大鼠神經(jīng)行為學評分明顯高于感染對照組，差異均具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。
　　結(jié)論:1.孕鼠腹腔注射LPS可以成功建立早產(chǎn)腦白質(zhì)損傷大鼠模型。
　　2.新生早產(chǎn)大鼠早期應(yīng)用rhEPO能夠減輕宮內(nèi)感染早產(chǎn)大鼠腦白質(zhì)損傷的炎癥反應(yīng)及星形膠質(zhì)細胞反應(yīng)性增生，對宮內(nèi)感染后的早產(chǎn)大鼠腦白質(zhì)損傷有一定的治療作用。
　　3.早期應(yīng)用rhEPO可以改善宮內(nèi)感