玉米幼苗水分脅迫誘導基因ZmCIPK1的克隆與功能分析.pdf

1、在高等植物體內(nèi)存在一類類似于酵母和動物體內(nèi)鈣調(diào)磷酸酶B的蛋白，簡稱CBL，它的靶蛋白是一類具有絲氨酸/蘇氨酸激酶活性的蛋白，被稱為CIPK(CBL-interactingproteinkinase)。最近的研究表明，CBLs與CIPKs家族可能在植物對逆境應答的信號轉導過程中起重要作用。在我們實驗室前期工作中，發(fā)現(xiàn)了一個受水分脅迫誘導表達的CIPK基因，暫時命名為ZmCIPK1，為了更好的理解ZmCIPK1在逆境應答中的作用，我們首先利

2、用RACE和RT-PCR方法克隆到ZmCIPK1基因，擴增cDNA全長為1652bp，5'端非翻譯區(qū)36bp，編碼區(qū)1416bp，3'端非翻譯區(qū)200bp，推測ZmCIPK1編碼471個氨基酸，分子量為51KDa。利用生物信息學技術對ZmCIPK1氨基酸序列分析發(fā)現(xiàn)ZmCIPK1蛋白N端22-282位是蛋白激酶區(qū)，其中22-113位是酪氨酸激酶區(qū)，C端是含有NAF結構域和PPI結構域的激酶調(diào)控區(qū)。亞細胞定位預測表明該蛋白可能是一個質膜蛋

3、白。Southern吸印/雜交表明ZmCIPK1在玉米基因組中以兩個copy形式存在。Northern吸印/雜交結果表明干旱、ABA、高鹽等逆境都誘導了ZmCIPK1表達量增加，而低溫條件下ZmCIPK1表達量沒有變化。植物在長期的進化過程中形成了一套非常完善的適應不良環(huán)境的機制，同一信號刺激能引發(fā)不同的信號傳遞途徑，各信號途徑之間存在復雜的交叉轉導作用，所以在現(xiàn)有研究基礎上徹底弄清CBLs與CIPKs之間的相互關系，對于揭示植物逆境信