內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激蛋白(BiP、CHOP)在多囊卵巢綜合征患者血白細(xì)胞中表達(dá)的研究.pdf

1、多囊卵巢綜合征(PCOS)是女性最常見(jiàn)的一種內(nèi)分泌失調(diào)疾病,是排卵障礙性不孕的主要原因。臨床表現(xiàn)為持續(xù)無(wú)排卵、高雄激素血癥及高胰島素血癥或胰島素抵抗(IR),其確切的發(fā)病率和發(fā)病機(jī)制尚不清楚。IR可能是PCOS的病理基礎(chǔ),IR引起的高胰島素血癥和高雄激素血癥導(dǎo)致了無(wú)排卵或稀發(fā)排卵、糖和脂代謝異常,由此導(dǎo)致糖尿病、高血脂和心血管疾病等遠(yuǎn)期并發(fā)癥發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)增加。研究證明內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激(ERS)引起IR,而IR是慢性代謝性疾病的發(fā)生基礎(chǔ)。因此我們推

2、測(cè)ERS可能導(dǎo)致PCOS患者IR的發(fā)生。ERS是指由于某種原因?qū)е录?xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)生理功能發(fā)生紊亂、鈣穩(wěn)態(tài)失衡、錯(cuò)誤折疊或未折疊的蛋白質(zhì)在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔內(nèi)聚集的一種亞細(xì)胞器的病理狀態(tài),是一種細(xì)胞自我保護(hù)的機(jī)制。BiP、CHOP是ERS的兩個(gè)標(biāo)志性蛋白,因此本文采用RT-PCR和Western Blotting方法在基因和蛋白水平觀察BiP、CHOP在PCOS患者血白細(xì)胞中的表達(dá)變化,探討ERS是否參與PCOS患者IR的發(fā)生。
　　目的:研究P

3、COS患者血白細(xì)胞中內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激蛋白BiP、CHOP的表達(dá)水平,進(jìn)一步探討內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激是否參與PCOS患者IR的發(fā)生。
　　方法:收集2012年3月至5月在安徽醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院生殖中心就診的PCOS患者血白細(xì)胞44例,PCOS的診斷均符合PCOS鹿特丹診斷標(biāo)準(zhǔn),年齡在18至35歲之間,并排除經(jīng)過(guò)相關(guān)治療的患者;同時(shí)收集同期同年齡段且月經(jīng)周期規(guī)則因男方因素或輸卵管因素不孕就診的患者血白細(xì)胞50例。PCOS患者根據(jù)胰島素抵抗指數(shù)(HO

4、MA-IR)又分為胰島素抵抗組與非胰島素抵抗組(當(dāng)HOMA-IR>2.69時(shí),表示患者存在胰島素抵抗)。應(yīng)用RT-PCR方法檢測(cè)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激蛋白BiP、CHOPmRNA在白細(xì)胞中的表達(dá)水平,應(yīng)用Western Blotting方法檢測(cè)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激蛋白BiP、CHOP蛋白在白細(xì)胞中的表達(dá)水平,比較PCOS組和對(duì)照組之間以及PCOS患者中胰島素抵抗組和非胰島素抵抗組之間是否存在差異。
　　結(jié)果:
　　1.兩組患者臨床指標(biāo)的比較

5、>　　PCOS組的平均年齡為(26.86±4.38)歲,對(duì)照組平均年齡為(27.14±3.91)歲。兩組年齡、體重指數(shù)(BMI)、泌乳素(PRL)、游離三碘甲狀原氨酸(FT3)、游離甲狀腺素(FRT4)、促甲狀腺激素(TSH)、總膽固醇(TCH)、低密度脂蛋白(LDL)、載脂蛋白B(APOB)和脂蛋白a(LPA)之間比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);兩組間雄烯二酮(A2)(3.37±1.69VS1.70±0.62)、促黃體生成激素

6、(LH)(12.66±6.88VS6.50±2.41)、雌二醇(E2)(289.29±276.05VS183.38±76.51)、睪酮(T)(1.85±1.80VS0.99±0.39)、游離睪酮指數(shù)(FTI)(7.24±7.82VS1.93±1.00)、空腹血糖(GLU)(5.65±1.50VS5.19±0.45)、空腹胰島素(INS)(14.47±12.76VS8.23±3.71)、HOMA-IR(3.79±3.72VS1.91±0.

7、90)、甘油三脂(TG)(1.12±0.55VS0.90±0.39)和極低密度脂蛋白(VLDL)(0.42±0.20VS0.33±0.15)比較,PCOS組均高于對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。而兩組間性激素結(jié)合球蛋白(SHBG)(34.48±17.04VS57.19±20.48)、卵泡生成激素(FSH)(5.52±1.23VS6.45±1.83)、高密度脂蛋白(HDL)(1.43±0.45VS1.60±0.32)和載脂蛋白A

8、(APOA)(1.40±0.24VS1.68±0.48)比較,PCOS組均明顯低于對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
　　2.內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激標(biāo)志性蛋白BiP、CHOPmRNA在PCOS組和對(duì)照組血白細(xì)胞中的表達(dá)水平
　　PCOS組患者血白細(xì)胞中BiPmRNA水平明顯高于對(duì)照組(1.67±1.02VS1.04±0.54),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。PCOS組患者血白細(xì)胞中CHOPmRNA水平較對(duì)照組有增高趨勢(shì)(0.

9、79±0.49VS0.63±0.47),但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。
　　3.內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激標(biāo)志性蛋白BiP、CHOP蛋白在PCOS組和對(duì)照組血白細(xì)胞中的表達(dá)水平
　　PCOS組患者血白細(xì)胞中BiP蛋白水平明顯高于對(duì)照組(0.76±0.12VS0.65±0.09),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。PCOS組患者血白細(xì)胞中CHOP蛋白水平較對(duì)照組有增高趨勢(shì)(0.75±0.30VS0.71±0.25),但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(

10、P>0.05)。
　　4.BiP和CHOPmRNA和蛋白在PCOS患者中胰島素抵抗組與非胰島素抵抗組血白細(xì)胞中的表達(dá)水平
　　PCOS患者中胰島素抵抗組和非胰島素抵抗組的BiPmRNA表達(dá)水平比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(1.69±1.18VS1.65±1.08,P>0.05)。同樣,兩組間的BiP蛋白表達(dá)水平亦無(wú)明顯差異(0.77±0.17VS0.75±0.09,P>0.05)。
　　PCOS患者中胰島素抵抗組和非胰島素抵

11、抗組的CHOPmRNA表達(dá)水平比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(0.80±0.56VS0.79±0.41,P>0.05)。同樣,兩組間的CHOP蛋白表達(dá)水平亦無(wú)明顯差異(0.76±0.38VS0.74±0.22,P>0.05)。
　　結(jié)論:PCOS患者血白細(xì)胞中內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激標(biāo)志性蛋白BiP、CHOP的表達(dá)異常,但PCOS患者中胰島素抵抗者的BiP、CHOP的表達(dá)與非胰島素抵抗者無(wú)明顯差異,提示內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激可能參與PCOS的發(fā)病,但內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激是否