表皮神經(jīng)纖維密度正常參考值的確定及皮膚神經(jīng)活檢用于周圍神經(jīng)病診斷的研究.pdf

1、目的：1、建立皮膚神經(jīng)活檢的方法學(xué)，確定我實驗室表皮神經(jīng)纖維密度的正常參考值。2、研究周圍神經(jīng)病變時皮膚神經(jīng)病理的改變，比較表皮神經(jīng)纖維密度與臨床表現(xiàn)、神經(jīng)電生理及腓腸神經(jīng)活檢結(jié)果的一致性。3、研究糖尿病周圍神經(jīng)病時皮膚神經(jīng)病理的改變及糖尿病周圍神經(jīng)病的相關(guān)危險因素。4、研究痛性周圍神經(jīng)病變時皮膚神經(jīng)病理的改變及探討可能的發(fā)病機(jī)制。 方法：1、招募10名健康志愿者，分別取大小腿皮膚，進(jìn)行蛋白基因產(chǎn)物9.5(9.5，PGP9.5)

2、、血管活性腸肽(VIP)、P物質(zhì)(SP)、降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)的免疫組化染色，計算表皮神經(jīng)纖維密度(IENFD)的正常參考值，明確真皮神經(jīng)叢及皮膚附屬器的神經(jīng)支配，確定VIP、SP、CGRP陽性纖維的分布和數(shù)量。2、對65例周圍神經(jīng)病病人行皮膚神經(jīng)活檢，進(jìn)行PGP9.5及各種神經(jīng)肽的免疫組化染色，計算INEFD，并觀察神經(jīng)纖維形態(tài)。對每例病人進(jìn)行詳細(xì)的神經(jīng)系統(tǒng)查體和感覺體征嚴(yán)重程度評分。其中57例患者做常規(guī)肌電圖及神經(jīng)傳導(dǎo)速度N

3、CV)檢查，40例做皮膚交感反射(SSR)檢查，18例行腓腸神經(jīng)活檢，對這些檢查結(jié)果的一致性進(jìn)行分析。3、分析26例糖尿病周圍神經(jīng)病變患者皮膚神經(jīng)病理改變的特點(diǎn)，探討IENFD與病程及血糖、糖化血紅蛋白的相關(guān)性。4、對27例痛性周圍神經(jīng)病病人進(jìn)行臨床特點(diǎn)分析，比較疼痛及無痛患者IENFD及SP、CGRP陽性神經(jīng)纖維數(shù)目的改變。 結(jié)果：1、用PGP9.5標(biāo)記神經(jīng)纖維，可見正常人表皮、真皮及皮膚附屬器有豐富的神經(jīng)纖維支配。我實驗室I

4、ENDF正常值：大腿為21.44±2.73根/mm，小腿為15.44±2.20根/mm，與國外各實驗室正常值相近似；大腿比小腿的表皮神經(jīng)纖維密度約高40％。VIP陽性纖維表達(dá)于立毛肌、汗腺腺泡及導(dǎo)管；SP及CGRP陽性纖維分布于表皮及真皮層神經(jīng)叢，神經(jīng)纖細(xì)，數(shù)量少；CGRP陽性纖維多于SP陽性纖維。2、周圍神經(jīng)病病人與健康志愿者相比，大小腿IENFD均有減少，差異有統(tǒng)計學(xué)意義。65例病人中，50例(76.9％)出現(xiàn)IENFD的異常，24

5、例伴神經(jīng)形態(tài)的改變；SCV異常者47.4％，SSR異常者62.5％。在小纖維神經(jīng)病病人中，IENFD異常61.3％，SSR異常38.9％。在有大纖維受累的病人中，IENFD異常91.2％，SCV異常79.4％。小腿IENFD下降的嚴(yán)重程度與臨床感覺癥狀評分相一致，與SCV異常相一致。腓腸神經(jīng)總有髓纖維密度及大、小有髓纖維密度與小腿IENFD均高度相關(guān)(r=0.576、0.560、0.524，P=0.020、0.024、0.037)。3、

6、糖尿病病人小腿IENFD與病程負(fù)相關(guān)(r=-0.517，P=0.346)，與血糖無相關(guān)性(r=-0.223，P=0.346)，與糖化血紅蛋白無相關(guān)性(r=-0.227，P=0.588)。糖耐量異常及糖尿病病人可在周圍神經(jīng)癥狀之前出現(xiàn)IENFD的下降。4、小腿IENFD在疼痛組病人(6.54±6.51根/mm)及無疼痛組病人(8.54±6.09根/mm)差異無顯著性意義(P>0.05)；SP陽性纖維在疼痛組(2.18±2.30根/4.5m

7、m)較無疼痛組(5.23±4.00根/4.5mm)顯著減低(P<0.05)；CGRP陽性纖維在疼痛組病人(12.56±8.48根/mm)較無疼痛組(21.04±10.33根/mm)顯著減低(P<0.05)。 結(jié)論：1、皮膚神經(jīng)活檢簡單安全，PGP9.5免疫組化染色計算IENFD方法可靠。SP、CGRP及VIP陽性纖維有不同的分布，可用于不同類型神經(jīng)纖維的鑒別。2、皮膚神經(jīng)病理檢查可用于小纖維神經(jīng)病的早期診斷，可以發(fā)現(xiàn)無癥狀的周圍

8、神經(jīng)病患者。除可出現(xiàn)IENFD的改變外，神經(jīng)纖維形態(tài)的改變也可提供診斷價值。皮膚神經(jīng)活檢可以觀察遠(yuǎn)近端神經(jīng)支配的不同。IENFD下降程度與SCV異常及有髓神經(jīng)纖維密度減低相一致，對于感覺為主的周圍神經(jīng)病，皮膚神經(jīng)活檢較腓腸神經(jīng)活檢更敏感。3、糖尿病周圍神經(jīng)病患者IENFD下降，即使無癥狀患者也可以有IENFD的下降，提示皮膚神經(jīng)活檢可以發(fā)現(xiàn)早期臨床下的糖尿病周圍神經(jīng)病。隨糖尿病病程的延長，表皮神經(jīng)纖維脫失程度逐漸加重。4、有疼痛組病人S