吳茱萸堿誘導(dǎo)人胃癌SCG-7901細(xì)胞凋亡的神經(jīng)酰胺機(jī)制.pdf

1、目的:觀察吳茱萸堿是否誘導(dǎo)人胃癌SGC-7901細(xì)胞凋亡及誘導(dǎo)胃癌細(xì)胞凋亡可能的機(jī)制，為吳茱萸堿藥理作用的進(jìn)一步研究提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　方法:體外培養(yǎng)人胃癌SGC-7901細(xì)胞，不同濃度吳茱萸堿或吳茱萸堿與胱天蛋白酶抑制劑（z-VAD-fmk）作用SGC-7901細(xì)胞12h、24h及36h:①M(fèi)TT比色法觀察吳茱萸堿對(duì)胃癌細(xì)胞增殖活性的影響。②AnnexinⅤ-FITC/PI雙染細(xì)胞，利用流式細(xì)胞儀觀察藥物對(duì)SGC-7901細(xì)胞的

2、凋亡影響。③Real-time PCR檢測(cè)aSMase和nSMase基因的表達(dá)情況，采用β-actin為內(nèi)參。④HPLC檢測(cè)神經(jīng)酰胺前體物質(zhì)鞘磷脂含量變化情況。
　　結(jié)果:①M(fèi)TT結(jié)果顯示，吳茱萸堿可抑制SGC-7901細(xì)胞增殖;AnnexinⅤ-FITC/PI雙染結(jié)果顯示，吳茱萸堿可誘導(dǎo)SGC-7901細(xì)胞凋亡，且隨劑量和時(shí)間的增加效果增強(qiáng);胱天蛋白酶抑制劑能夠抑制吳茱萸堿誘導(dǎo)SGC-7901細(xì)胞的凋亡作用，但其不能完全阻止吳茱

3、萸堿誘導(dǎo)SGC-7901細(xì)胞的凋亡作用。②Real-time PCR結(jié)果顯示吳茱萸堿或吳茱萸堿與胱天蛋白酶抑制劑可使SGC-7901細(xì)胞內(nèi)的aSMase和nSMase基因表達(dá)增高，但吳茱萸堿與胱天蛋白酶抑制劑處理胃癌細(xì)胞后的基因表達(dá)較吳茱萸堿處理胃癌細(xì)胞低。③HPLC結(jié)果顯示各處理組鞘磷脂含量減少，但胱天蛋白酶抑制劑與吳茱萸堿處理組鞘磷脂含量較吳茱萸堿處理組合量高。
　　結(jié)論:吳茱萸堿能直接抑制人胃癌SGC-7901細(xì)胞增殖并誘導(dǎo)