2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
已閱讀1頁,還剩64頁未讀, 繼續(xù)免費閱讀

下載本文檔

版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請進行舉報或認(rèn)領(lǐng)

文檔簡介

1、TET(Ten-Eleven-Translocation)蛋白是一種Fe2+和α-酮戊二酸依賴的雙加氧酶,具有催化5-甲基胞嘧啶轉(zhuǎn)化為5-羥甲基胞嘧啶的功能。TET蛋白通過調(diào)節(jié)基因組中5-甲基胞嘧啶和5-羥甲基胞嘧啶的含量,從而影響基因表達調(diào)控、印記基因的發(fā)生和腫瘤的形成。
  目前人們在TET的研究中發(fā)現(xiàn)3種具有催化5-甲基胞嘧啶羥基化保守活性區(qū)域的蛋白,分別稱為TET1,TET2,TET3。我們通過PCR方法從人和斑馬魚基因組

2、cDNA文庫中擴增出了4種TET蛋白家族成員保守區(qū)域基因片段,將其克隆到pET28b表達載體上,通過點突變方法對目的基因進行初步的密碼子優(yōu)化。我們根據(jù)TET蛋白家族成員保守區(qū)域特點,在優(yōu)化密碼子突變體基礎(chǔ)上構(gòu)建了16種TET蛋白突變體,通過改變誘導(dǎo)培養(yǎng)條件,構(gòu)建SUMO和TET突變體融合蛋白,構(gòu)建trigger factor與TET共表達體系,摸索出TET蛋白表達及可溶性最佳條件。我們對于以包涵體形式存在的TET突變體蛋白沉淀用尿素等強

3、變性劑溶解,通過鎳螯合柱親和層析方法獲得8種變性TET突變體蛋白,用自己配制的96種不同蛋白復(fù)性溶液,對變性TET突變體蛋白進行復(fù)性,利用圓二色譜儀和熒光光譜儀分別表征復(fù)性后的TET突變體蛋白的結(jié)構(gòu)性質(zhì)。
  本課題研究發(fā)現(xiàn)密碼子優(yōu)化后的TET突變體在大腸桿菌中表達量增加,大腸桿菌表達得到的TET突變體蛋白幾乎以包涵體形式存在。融合蛋白SUMO及分子伴侶triggerfactor能夠提高部分TET突變體蛋白可溶性。通過復(fù)性溶液的篩

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
  • 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

評論

0/150

提交評論