負壓創(chuàng)面治療減輕燒傷創(chuàng)面銅綠假單胞菌感染的實驗研究.pdf

1、研究背景：
　　燒傷創(chuàng)面感染是嚴重燒傷患者后期形成創(chuàng)面膿毒癥的主要原因，是導致燒傷患者后期死亡的重要原因。銅綠假單胞菌是最常見的燒傷創(chuàng)面感染菌之一，在燒傷創(chuàng)面感染后繼續(xù)繁殖和擴增，可以導致嚴重燒傷患者并發(fā)膿毒癥，大大增加了死亡率。近年來，燒傷ICU中銅綠假單胞菌的檢出率和多重耐藥率逐年增加,給抗生素治療帶來了極大地挑戰(zhàn)。因此，創(chuàng)面局部抗感染治療目前多采用抗感染敷料或負壓封閉治療。種類繁多的抗感染敷料，各有利弊及適應癥。
　　

2、大量文獻報道，NPWT能減輕局部組織水腫，增加創(chuàng)周血液流量，清除創(chuàng)面細菌，促進肉芽組織形成及加速創(chuàng)面愈合。因此NPWT也被廣泛用于各種復雜創(chuàng)面處理。但對于燒傷創(chuàng)面感染后早期使用NPWT的治療效果及可能存在的生物學效應仍有待進一步研究。為此，我們首先驗證NPWT對感染創(chuàng)面細菌的清除作用，并觀察創(chuàng)緣炎性細胞浸潤情況，同時檢驗了本實驗中使用的細菌熒光素酶標記的銅綠假單胞菌表達熒光的穩(wěn)定性。在此基礎(chǔ)上，我們建立了銅綠假單胞菌感染燒傷創(chuàng)面的小鼠模

3、型，觀察NPWT作用下細菌的擴散、小鼠死亡率、血清炎性因子水平變化和主要臟器損傷情況，探討在燒傷感染早期創(chuàng)面使用NPWT相關(guān)生物學效應及其意義。
　　方法：
　　1.雄性C57小鼠40只，隨機分為治療組和對照組。建立全層皮膚缺損感染模型，感染后24小時，對治療組行NPWT治療，對照組常規(guī)凡士林油紗換藥。治療24小時后，觀察創(chuàng)面標記菌熒光表達量；創(chuàng)面細菌培養(yǎng)并計數(shù)；HE染色觀察創(chuàng)緣皮膚組織炎性細胞浸潤。
　　2.雄性C5

4、7小鼠50只，隨機分為燙傷感染組和假燙感染組。燙傷感染組造成動物背部Ⅲ度燙傷后，將銅綠假單胞菌菌液注射于燙傷焦痂下，造成創(chuàng)面感染。假燙感染組常溫霧化水蒸汽接觸背部皮膚后，將銅綠假單胞菌菌液注射于假燙皮下。以實驗第7天為實驗結(jié)束時間。實時動態(tài)觀察標記菌在創(chuàng)面增殖和擴散；統(tǒng)計7天死亡率；感染24小時后，檢測脾臟中銅綠假單胞菌的陽性率。
　　3.雄性C57小鼠90只，隨機分為治療組和對照組，實驗開始前24小時建立燒傷創(chuàng)面感染模型，實驗當

5、天去除焦痂，治療組行NPWT，對照組常規(guī)凡士林油紗換藥。以實驗第7天為實驗結(jié)束時間。期間觀察創(chuàng)面標記菌繁殖和擴散情況、7天死亡率、炎性因子水平、HE染色觀察主要臟器損傷情況。
　　結(jié)果：
　　1.創(chuàng)面感染早期使用NPWT可顯著降低創(chuàng)面細菌含量（P＜0.01），創(chuàng)緣組織中炎性因子浸潤治療組明顯少于對照組（P＜0.05）。
　　2.燙傷組中標記菌熒光表達量明顯高于假燙組（P＜0.01），熒光表達范圍也較假燙組大；7天累積死

6、亡率燙傷組顯著高于假燙組（P＜0.01，83.3％VS8.3％）；傷后24小時脾臟細菌培養(yǎng)燙傷組陽性率100％，檢出菌均為銅綠假單胞菌。
　　3.實驗第三天，與對照組相比，NPWT可明顯減少創(chuàng)面組織中標記菌含量（P＜0.01），降低血清促炎因子水平（P＜0.01）。相對于造模后未處理組，NPWT組7天動物累積死亡率明顯降低（P＜0.01），但與對照組相比死亡率無顯著差異。主要臟器組織切片觀察NPWT組臟器損傷較輕。
　　結(jié)論