多參數(shù)流式細胞免疫表型積分系統(tǒng)在骨髓增生異常綜合征診斷和預后中的初步應用研究.pdf

1、背景和目的：骨髓增生異常綜合征(myelodysplastic syndome,MDS)是一組異質性惡性克隆性造血干/祖細胞疾病。目前MDS診斷主要依賴于綜合患者臨床癥狀、血象、外周血及骨髓涂片和骨髓活檢形態(tài)學以及細胞遺傳學等的結果，然而MDS臨床表現(xiàn)可以多種多樣，形態(tài)學變化受主觀因素干擾大，而且只有約40%～50%患者檢出細胞遺傳學異常，因此有時難以確定MDS診斷。近年來，流式細胞術（flow cytometry，F(xiàn)CM）已經(jīng)廣泛應用

2、于血液系統(tǒng)腫瘤（如白血病和淋巴瘤）的免疫表型檢測，為診斷、分型、治療和預后提供客觀的輔助依據(jù)。MDS作為血液系統(tǒng)腫瘤的一種，本研究利用多參數(shù)流式細胞術了解MDS患者骨髓細胞免疫表型特征，并通過初步構建流式積分系統(tǒng)，探討其在診斷、鑒別診斷及預后中的臨床意義。
　　 方法：收集41例MDS患者和30例非MDS患者骨髓標本，應用多參數(shù)流式細胞術，采取一系列的抗體組合和CD45/SSC設門策略，對骨髓細胞表面抗原表達及原始細胞數(shù)進行檢測

3、，采用兩獨立樣本t檢驗和單方向方差分析比較MDS與non-MDS及MDS亞型間原始細胞數(shù)、各抗原表達情況及流式積分，分析其免疫表型特點，并據(jù)此構建流式積分系統(tǒng)，同時結合血液學、形態(tài)學及細胞遺傳學等檢查結果，采用ROC曲線分析和Spearman相關分析評價該積分系統(tǒng)的優(yōu)缺點。用SPSS13.0統(tǒng)計軟件對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析。
　　 結果：MDS與non-MDS相比，原始細胞、單核細胞、淋巴細胞及有核紅細胞群比例均顯著升高（p值分別為：

4、0.000、0.000、0.001及0.029），而成熟粒細胞群比例顯著下降（P=0.021）；原始細胞群比例在RCMD、RAEB-I和RAEB-II亞型間逐漸增高，在RCMD與RAEB-I、RCMD與RAEB-II及RAEB-I與RAEB-II亞型間有顯著差異（p值分別為：0.020、0.000及0.010），余細胞群比例亞型間無顯著差異（p值均＞0.05）。CD34、CD123和CD133在原始細胞群表達顯著增高（p值分別為：0.0

5、00、0.003和0.000），CD38、HLA-DR、CD13、CD33、CD7和CD117表達均無顯著差異（p值分別為：0.223、0.306、0.536、0.273、0.577和0.368）；CD34在RCMD、RAEB-I和RAEB-II亞型間表達逐漸升高，在RCMD與RAEB-I、RCMD與RAEB-II及RAEB-I與RAEB-II亞型間表達有顯著差異（p值分別為：0.022、0.000和0.000），CD133、CD117

6、、CD13和HLA-DR在RAEB-II表達比RCMD顯著增高（p值分別為0.001、0.000、0.001和0.047）；其余抗原亞型間比較均無顯著差異（P＞0.05）。CD10、CD11b、CD15、CD16和CD66d在成熟粒細胞群表達顯著增高（p值分別為：0.012、0.027、0.016、0.005和0.024）；CD33、CD13、HLA-DR、CD56及CD117表達均無顯著差異（p值分別為0.058、0.337、0.64

7、9、0.096和0.081）；CD10在RAEB-II型表達顯著低于RAEB-I型（P=0.001）；CD13和HLA-DR在RCMD型表達顯著低于RAEB-I和RAEB-II型（p分別為0.013、0.005和0.018、0.003）；其余抗原亞型間比較均無顯著差異（P＞0.05）。
　　 CD15、CD33和CD64 在單核細胞群表達均顯著升高（p值分別為：0.001、0.007和0.000）；CD7、HLA-DR、CD14

8、、CD13、CD61和CD56表達均無顯著差異（p值分別為：0.075、0.066、0.408、0.153、0.137和0.322）；所有抗原亞型間比較均無顯著差異（P＞0.05）。
　　 在淋巴細胞群CD25+CD8+、CD7和CD8表達顯著升高（p值分別為：0.000、0.002和0.004），CD5和CD19表達顯著降低（p值分別為0.011和0.000）；CD25+CD4+、CD4、CD25和CD56表達均無顯著差異（p

9、值分別為：0.524、0.508、0.942和0.978）；CD5在RCMD和RAEB-II的表達均顯著高于RAEB-I（p值分別為：0.006和0.037）。其余抗原亞型間比較均無顯著差異（P＞0.05）。
　　 GPA+CD71+、CD71、CD105和GPA在有核紅細胞群表達均顯著升高（p值分別為：0.026、0.020、0.033和0.024），GPA+CD105+和CD71+CD105+表達均無顯著差異（P值分別為：0

10、.050和0.938）。所有抗原亞型間比較均無顯著差異（P＞0.05）。
　　 在41例MDS患者中有7例檢出復雜核型異常，且均為RAEB-II患者，占MDS患者的17%，占RAEB-II患者的47%；核型異常與IPSS積分呈顯著正相關（r=0.703，P=0.000）。
　　 通過骨髓原始細胞數(shù)和各細胞群不同抗原表達情況初步構建流式積分系統(tǒng)，該積分系統(tǒng)用于MDS診斷有較高符合率（P=0.000），95%可信區(qū)間為（0.

11、921，0.997），靈敏性和特異性分別為：87.8%和86.7%，MDS組比non-MDS組流式積分顯著升高（P=0.000），RCMD、RAEB-I和RAEB-II亞型間，隨著疾病進展，流式積分也顯著升高（P=0.000）。
　　 流式積分與MDS分型、染色體核型、IPSS和WPSS呈顯著正相關（r值分別為：0.656、0.410、0.791和0.425，p值分別為：0.000、0.008、0.000和0.006）。骨髓各細