MiRNA-92a可下調(diào)TrkA蛋白表達(dá)并促進(jìn)神經(jīng)母細(xì)胞瘤增殖和遷移.pdf

1、目的:探討miRNA-92a是否調(diào)控TrkA蛋白的表達(dá)并影響神經(jīng)母細(xì)胞瘤的增殖和遷移能力。
　　方法:通過(guò)RT-q PCR技術(shù)檢測(cè)神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞系BE(2)-M17細(xì)胞在轉(zhuǎn)染miRNA-92a mimics或miRNA-92a inhibitor后miRNA-92a和TrkA mRNA的相對(duì)表達(dá)量,分別以U6和β-actin為內(nèi)參基因;流式細(xì)胞術(shù)測(cè)TrkA蛋白的表達(dá)變化;CCK-8法測(cè)細(xì)胞的增殖能力的變化;transwell小室

2、實(shí)驗(yàn)分析對(duì)細(xì)胞遷移能力的影響。
　　結(jié)果:
　　1.RT-qPCR對(duì)miRNA-92a進(jìn)行相對(duì)定量分析,結(jié)果顯示:與陰性對(duì)照相比,轉(zhuǎn)染miRNA-92a mimics后miRNA-92a表達(dá)顯著上調(diào);轉(zhuǎn)染miRNA-92a inhibitor后miRNA-92a表達(dá)顯著下調(diào)。
　　2.CCK-8法測(cè)細(xì)胞的增殖能力的變化,結(jié)果顯示:與陰性對(duì)照相比,轉(zhuǎn)染miRNA-92a mimics后,細(xì)胞增殖能力顯著增強(qiáng);轉(zhuǎn)染miRN

3、A-92a inhibitor后細(xì)胞增殖能力顯著降低。
　　3.transwell小室實(shí)驗(yàn)分析對(duì)細(xì)胞遷移能力的影響,結(jié)果顯示:與陰性對(duì)照相比,轉(zhuǎn)染miRNA-92a mimics后,細(xì)胞遷移能力顯著增強(qiáng);轉(zhuǎn)染miRNA-92a inhibitor后,細(xì)胞遷移能力顯著降低。
　　4.RT-qPCR對(duì)TrkA mRNA進(jìn)行相對(duì)定量分析,結(jié)果顯示:與陰性對(duì)照組相比,轉(zhuǎn)染miRNA-92a mimics后TrkA mRNA水平明顯降

4、低;轉(zhuǎn)染miRNA-92a inhibitor后TrkA mRNA水平明顯增高。
　　5.通過(guò)流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)TrkA蛋白,結(jié)果顯示:與陰性對(duì)照相比,轉(zhuǎn)染miRNA-92a mimics后TrkA蛋白表達(dá)顯著下調(diào);轉(zhuǎn)染miRNA-92a inhibitor后TrkA蛋白表達(dá)顯著上調(diào)。
　　結(jié)論:
　　1.miRNA-92a可顯著下調(diào)TrkA mRNA的表達(dá)水平;
　　2.miRNA-92a可顯著下調(diào)TrkA蛋白的表