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1、中山大學碩士學位論文MicrNA21促進宮頸癌HeLa細胞增殖并下調(diào)PDCD4蛋白表達姓名:姚青申請學位級別:碩士專業(yè):生物化學與分子生物學指導教師:屈良鵠20090608MicroRNA21促進宮頸癌HeLa細胞增殖并下調(diào)PDCD4蛋白表達細胞的增殖和生長狀況。結(jié)果顯示,抑制內(nèi)源miR21會對HeLa細胞的增殖產(chǎn)生明顯的抑制作用,在抑制細胞增殖的同時還可能促進細胞凋亡。我們還用熒光素酶雙報告載體系統(tǒng),在HeLa細胞內(nèi)檢測了miR21對
2、Pdcd43’UTR預測靶標位點的作用。結(jié)果證明在HeLa細胞中miR21能夠直接作用于Pdcd43’UTR并抑制熒光素酶的表達,并且僅預測位點的18bp序列片段也具有抑制的功能。這樣抑制的效應會隨著我們對3UTR靶標區(qū)域的突變而回復,說明抑制效應確實是由靶標位點序列引起。最后,我們用westernblot檢測了antimiR21轉(zhuǎn)染細胞后PDCD4蛋白的表達量。wt:stem的結(jié)果顯示抑制內(nèi)源miR21之后會上調(diào)PDCD4蛋白的表達。
3、PDCD4蛋白是細胞中重要的抑癌基因,有研究顯示這個基因可以抑制蛋白質(zhì)的合成。因此,抑制內(nèi)源miR21使得PDCD4表達上調(diào),也從某種程度上支持了miR21在HeLa細胞中作為致癌基因的可能性。綜上所述,本論文初步研究了miR21在HeLa細胞中的功能以及作用機制。這將miR21作為人類中致癌基因的普遍性向一種新的癌癥細胞推進了一步,并可為以后在宮頸癌細胞中miR21的分子機制的研究提供有價值的參考。關(guān)鍵詞:microRNA21,PDC
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