肝炎病毒誘導(dǎo)抗β-,1--腎上腺素能受體抗體產(chǎn)生及其功能的研究.pdf

1、第一部分肝炎病毒性心肌炎患者抗β1-腎上腺素能受體抗體的觀察;目的:觀察抗β<,1>-腎上腺素能受體抗體在肝炎病毒性心肌炎中的檢出率及其可能的臨床意義.方法103例病毒性心肌炎患者根據(jù)病原學(xué)檢測(ELISA法檢測甲、乙、丙肝炎病毒抗體,RT-PCR法檢測腸病毒)分為肝炎病毒性心肌炎組(n=29)和腸病毒性心肌炎組(n=74).觀察指標(biāo)包括抗β<,1>-腎上腺素能受體抗體(ELISA法檢測),肝功能,磷酸肌酸激酶(CK)和肌鈣蛋白(cTn

2、T),心電圖,超聲心動(dòng)圖等.第二部分肝炎病毒心肌炎患者抗β<,1>-腎上腺素能受體抗體增加心肌細(xì)胞鈣電流和胞內(nèi)鈣濃度的研究;目的:研究肝炎病毒心肌炎患者抗β<,1>-腎上腺素能受體抗體對心肌細(xì)胞動(dòng)作電位、L型鈣電流和胞內(nèi)鈣的的影響.方法15例抗β<,1>-腎上腺素能受體抗體陽性的肝炎病毒性心肌炎患者血清經(jīng)辛酸提取法提取IgG.langendorff37℃恒溫灌流酶解分離心肌細(xì)胞.通過免疫熒光顯示抗β1-腎上腺素能受體抗體與豚鼠心肌細(xì)胞的

3、結(jié)合.利用膜片鉗技術(shù)和激光共聚焦技術(shù)觀察抗β<,1>-腎上腺素能受體抗體對豚鼠心肌細(xì)胞動(dòng)作電位、L型鈣電流和胞內(nèi)鈣的影響以及美托洛爾的藥物干預(yù)情況.通過對比加入抗體前后心肌細(xì)胞的形態(tài)變化和臺盼藍(lán)染色情況,觀察抗體對心肌細(xì)胞的毒性.第三部分乙型肝炎病毒誘導(dǎo)小鼠抗β<,1>-腎上腺素能受體抗體產(chǎn)生及其致心律失常的機(jī)制;目的: 通過在體和離體動(dòng)物實(shí)驗(yàn),探索乙型肝炎病毒誘導(dǎo)的抗β<,1>-腎上腺素能受體抗體在肝炎病毒性心肌炎發(fā)生和發(fā)展中的作用.

4、方法實(shí)驗(yàn)組(n=30)于實(shí)驗(yàn)第1,14,28和42天4次以乙型肝炎病毒與完全弗氏佐劑混合成乳化劑接種,對照組(n=30)用生理鹽水按同樣的方法假性免疫.兩組小鼠分別于實(shí)驗(yàn)O、13、27和34天記錄心電圖.第O,14,28,35天眼內(nèi)眥靜脈取血,第56天摘眼球取血并留取心臟和肝臟標(biāo)本,ELISA法檢測抗β<,1>-腎上腺素能受體抗體,光學(xué)顯微鏡下觀察心肌和肝臟的病變.通過免疫熒光顯示小鼠抗β<,1>-腎上腺素能受體抗體與豚鼠心肌細(xì)胞的結(jié)合