褪黑素減輕博來霉素誘發(fā)小鼠肺纖維化早期的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應激反應.pdf

1、目的：探討褪黑素（MT）是否能減輕由博來霉素(BLM)誘發(fā)小鼠肺纖維化早期的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應激反應。
　　方法：將成年健康雄性ICR小鼠隨機分為對照組、MT組、BLM組和MT+BLM組。MT組小鼠給予生理鹽水前30min經(jīng)腹腔注射MT（10 mg·kg-1）并在給予生理鹽水后按24h/次經(jīng)腹腔注射MT（10 mg·kg-1），BLM組小鼠經(jīng)氣管插管單次給予BLM（5 mg·kg-1），MT+BLM組小鼠在給予BLM（5 mg·kg-1）前

2、30min經(jīng)腹腔注射給予MT（10 mg·kg-1）并在給予BLM后按24h/次經(jīng)腹腔注射給予MT（10 mg·kg-1），對照組小鼠經(jīng)氣管插管給予等容積的生理鹽水。各組分別在BLM處理后不同時間點（24h，72h）剖殺小鼠并取材，肺組織進行病理切片，HE染色法觀察肺部炎性細胞浸潤情況，Western blot技術檢測內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應激（ER stress）相關蛋白（GRP78、p-eIF2α和p-IRE1α）的表達水平，免疫組化技術檢測ER

3、stress相關蛋白（GRP78、p-IRE1α、ATF6α和p-PERK）的分布。
　　結(jié)果：成功構(gòu)建了小鼠肺纖維化急性炎癥模型；在BLM處理后，肺重、肺重比和肺炎性細胞浸潤明顯增加，并呈明顯時間-效應關系；MT可明顯降低BLM引起的肺重和肺重比增加，減輕肺部炎性細胞浸潤；Western blot顯示，MT處理后明顯對抗BLM引起的ER stress敏感蛋白GRP78蛋白的上調(diào)，抑制BLM引起的UPR通路相關蛋白eIF2α和IR