鱉甲活性多肽凍干粉的研制及其體外降解和腸吸收研究.pdf

1、鱉甲為傳統(tǒng)藥食兩用中藥，來源于鱉科動物鱉(Trionyx sinensis Wiegmann)的背甲，具有滋陰潛陽，軟堅散結(jié)，退熱除蒸的功效，收載于歷年版《中國藥典》，主要用于治療陰虛發(fā)熱，虛風(fēng)內(nèi)動，癥瘕等病癥。多篇文獻(xiàn)報道，鱉甲及其為君藥的復(fù)方制劑臨床用來治療肝纖維化疾病，具有很好的療效?，F(xiàn)代藥理研究表明，鱉甲提取物具有明顯抗肝纖維化作用，但其發(fā)揮藥效的物質(zhì)基礎(chǔ)不明確。鱉甲中含有大量肽類成分，還含有氨基酸、多糖、動物膠、角質(zhì)、微量元素

2、等成分。本課題組前期細(xì)胞實驗及動物實驗研究結(jié)果顯示，鱉甲水提液分子量6kD以下的肽類成分能抑制肝星狀細(xì)胞（HSC-T6）增殖，并初步探討了其抗肝纖維化的作用機(jī)理，確定其為鱉甲具有抗肝纖維化作用的活性部位，并在此基礎(chǔ)上采用多級膜分離技術(shù)制備得到了鱉甲活性多肽部位。本論文在中醫(yī)藥理論的指導(dǎo)下，以前期的實驗研究為依據(jù)，開展了鱉甲活性多肽凍干粉劑的研究，并進(jìn)行了鱉甲活性多肽類物質(zhì)模擬胃腸環(huán)境的生物轉(zhuǎn)化及腸外翻吸收的初步研究，為進(jìn)一步將鱉甲開發(fā)研

3、制成抗肝纖維化創(chuàng)新中藥及詮釋其藥效物質(zhì)基礎(chǔ)提供科學(xué)依據(jù)。本論文完成的主要研究工作有：
　　（1）采用現(xiàn)代制劑技術(shù)，對鱉甲活性多肽制劑工藝的凍干保護(hù)劑的種類及其用量、凍干工藝參數(shù)等進(jìn)行了系統(tǒng)研究，確定了合理制備工藝參數(shù)；進(jìn)行了中試試驗，可過渡到產(chǎn)業(yè)化。
　?。?）采用現(xiàn)代分析技術(shù)，對鱉甲活性多肽凍干粉的性狀、指紋圖譜、含量測定以及砷鹽、重金屬、復(fù)溶時間、水分檢查等進(jìn)行了較為系統(tǒng)的研究，制定了較為完善的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，能有效控制鱉甲活

4、性多肽凍干粉的質(zhì)量。
　　（3）按照《中藥天然藥物穩(wěn)定性研究技術(shù)指導(dǎo)原則》，采用加速試驗和自然貯存試驗研究方法，對鱉甲活性多肽凍干粉的穩(wěn)定性進(jìn)行了考察。目前已完成3個月的穩(wěn)定性試驗，各項考察指標(biāo)均符合要求，表明鱉甲活性肽凍干粉在一段時間內(nèi)質(zhì)量穩(wěn)定。
　?。?）采用模擬胃腸環(huán)境的實驗方法，開展鱉甲活性多肽類物質(zhì)體外生物轉(zhuǎn)化研究。結(jié)果顯示，鱉甲活性多肽在胃腸環(huán)境下均可產(chǎn)生物質(zhì)變化，特別是在人工腸液環(huán)境下變化顯著，產(chǎn)生了2個新的物