菲牛蛭凍干粉去腥試驗(yàn)及其腥味評(píng)價(jià)方法研究.pdf

1、菲牛蛭凍干粉為醫(yī)蛭科動(dòng)物菲牛蛭Poecilobdella manillensisLesson.新鮮全體的加工炮制品。其主要功效為破血通經(jīng)、逐瘀消癥，現(xiàn)代臨床多用于高血壓、高血脂、腦血栓等心腦血管疾病的治療。菲牛蛭的主要藥理活性物質(zhì)為菲牛蛭素、水蛭素等，其具有熱不穩(wěn)定性，采用滑石粉燙、焙干、炒制等炮制方法會(huì)極大降低活性，影響藥材藥效?，F(xiàn)代的低溫冷凍加工工藝，最大程度的保留了水蛭藥材的抗凝活性，但同時(shí)也使藥材的腥味顯著，服用困難。本文旨在以

2、腥味得分和抗凝活性為評(píng)價(jià)指標(biāo)，通過(guò)系統(tǒng)的去腥實(shí)驗(yàn)，篩選菲牛蛭凍干粉最佳加工方法；同時(shí)對(duì)菲牛蛭凍干粉的腥味成分進(jìn)行化學(xué)成分分析，結(jié)合現(xiàn)代技術(shù)手段，探索菲牛蛭凍干粉的腥味評(píng)價(jià)方法，為菲牛蛭凍干粉的制劑開(kāi)發(fā)提供理論依據(jù)。
　　1、菲牛蛭凍干粉去腥方法篩選
　　采用物理方法（活性炭吸附、減壓旋蒸、環(huán)狀糊精包埋）、化學(xué)方法（酸、堿、鹽、有機(jī)試劑、氧化劑、抗氧化劑、矯味劑）、生物方法（酵母發(fā)酵、干酵母醇脫氫酶粗提液浸漬）以及其他方法（茶

3、、中藥材、香料提取液浸漬）對(duì)菲牛蛭凍干粉的去腥方法進(jìn)行系統(tǒng)地考察，優(yōu)選出以環(huán)狀糊精和中藥提取液為去腥劑的處理方法。并在此基礎(chǔ)上通過(guò)復(fù)合方法進(jìn)行去腥方法優(yōu)化，以去腥效果和抗凝活性為指標(biāo)，確定了以紅花提取液（含50％丙酮）和7%的環(huán)狀糊精溶液（含50%丙酮）3:1混合，以料液比1:5添加，50℃水浴1h為最佳工藝。用此條件處理后的樣品腥味感官得分為2.5分（未處理菲牛蛭凍干粉腥味感官得分為10分），抗凝活性為668.1U/g（未處理菲牛蛭凍

4、干粉抗凝活性為818.4U/g）。并對(duì)樣品中的乙醇和丙酮?dú)埩袅窟M(jìn)行了檢測(cè)，結(jié)果乙醇未在樣品中檢出，丙酮?dú)埩袅糠稀吨袊?guó)藥典》二部中溶劑殘留規(guī)定，該方法安全可靠。
　　2.菲牛蛭凍干粉主要腥味成分分析
　　首次對(duì)菲牛蛭凍干粉揮發(fā)性物質(zhì)進(jìn)行分析。采用GC-MS法，共分離鑒定了45種揮發(fā)性物質(zhì)，包括酸類（48.34%）、烴類（21.47%）、酯類（20.27%）、醛類（3.21%）以及其他化合物（6.71%）。
　　對(duì)去腥前

5、后的揮發(fā)性物質(zhì)進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)去腥后有8種物質(zhì)未被檢出：6-苯基十一烷、1,7,11-三甲基-4-（1-異丙基苯）環(huán)十四烷、二苯基乙炔、4-三甲基乙氨基苯甲酸、二十四烷酸、11-十六碳烯酸、4-硝基苯甲酸乙酯、1-氨基蒽；增加了14種組分：1-十九烯、5-二十烯、1-二十六烯、壬基環(huán)丙烷、十五烷、十六烷、環(huán)己烷、十九烷、環(huán)十二烷、二十四烷、二十一（烷）基酯、十二烷基乙二醇、菲、油酸酰胺。此外，壬醛、癸醛、17-十八烯醛、順式-9-二十三烯

6、、戊酸、肉豆蔻酸、正十五酸、棕櫚酸、十七烷酸、亞油酸、鄰苯二甲酸二正辛酯等11種成分的相對(duì)含量有明顯降低?？傮w看來(lái)，去腥后酸類、酯類、烴類以及醛類變化較大：酸類由48.34%減少到22.29%，酯類由20.27減少到11.40%，烴類物質(zhì)由21.47%增加到52.52%，醛類由3.21%減少到了1.02%。
　　通過(guò)比較不同腥味得分樣品中揮發(fā)性成分的變化，并結(jié)合氣味活度值分析，確定了壬醛、癸醛、17-十八烯醛3種醛和棕櫚酸為腥味重

7、要貢獻(xiàn)物質(zhì)（ROAV≥0.1）。此4種腥味成分雖在去腥后未能完全除去，但相對(duì)含量均有大幅減少，且總量由21.76%減少到7.19%，降幅達(dá)到66.96%，與腥味感官得分由10分降低到2.5分，降幅75.00%較為吻合。
　　通過(guò)對(duì)菲牛蛭凍干粉中檢出的揮發(fā)性物質(zhì)進(jìn)行分析，探討其腥味的來(lái)源。水產(chǎn)品中常見(jiàn)的腥味成分三甲胺等物質(zhì)未在樣品中檢出，可推斷菲牛蛭中尚不存在氧化三甲胺。此外，由微生物等代謝產(chǎn)生的土臭素和二甲基異冰片等也未見(jiàn)檢出，因

8、此菲牛蛭的腥味與環(huán)境中腥味成分的累積作用無(wú)關(guān)。研究確定的4種腥味成分與脂肪酸有密切聯(lián)系，因此推斷菲牛蛭凍干粉腥味物質(zhì)的產(chǎn)生可能與脂肪氧化有關(guān)。
　　3.菲牛蛭凍干粉腥味程度的評(píng)價(jià)方法研究
　　通過(guò)建模對(duì)菲牛蛭凍干粉腥味評(píng)價(jià)方法進(jìn)行了研究。采用紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)、電子鼻以及氣相質(zhì)譜儀，將感官得分指標(biāo)與儀器記錄數(shù)據(jù)聯(lián)系。硫代巴比妥酸值（TBARS）法利用紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)對(duì)測(cè)得的TBARS值和腥味得分值進(jìn)行曲線擬合，未能得到較好

9、的模型。電子鼻法通過(guò)多元線性回歸模型、主成分回歸模型、支持向量機(jī)回歸、神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)回歸4種模型進(jìn)行建模，得到的模型決定系數(shù)R2分別為0.75，0.11，0.27，0.27，模型效果差。氣相質(zhì)譜儀法通過(guò)比較不同得分樣品揮發(fā)性成分的變化，并分析了腥味得分與成分的相關(guān)性，得到了以壬醛、癸醛、順式-9-二十三烯、戊酸、棕櫚酸、鄰苯二甲酸二正辛酯為自變量，感官得分為因變量的多元線性模型，模型擬合度優(yōu)異，可用于菲牛蛭凍干粉腥味的評(píng)價(jià)，最終建立了以氣相質(zhì)