水溶性紫杉醇凍干粉臨床前藥物初步評價.pdf

1、紫杉醇已于1992年被美國FDA批準(zhǔn)作為抗卵巢癌新藥上市，紫杉醇對卵巢癌、乳腺癌、肺癌等多種腫瘤有良好的治療效果。但是由于其難溶于水，需要溶于聚氧乙烯蓖麻油(cremophor EL)與無水乙醇混合溶媒中增加其水溶性，而聚氧乙烯蓖麻油在體內(nèi)降解時釋放組胺，會引起不同程度的過敏反應(yīng)，嚴(yán)重者可引起神經(jīng)細(xì)胞內(nèi)顆粒釋放及骨髓鞘改變等不良效果。為降低藥物毒性，提高其療效，近年來各國都在陸續(xù)開發(fā)紫杉醇的新劑型，本實驗室利用紫杉醇、人血白蛋白及甘露醇

2、，通過乳化法制備出水溶性紫杉醇凍干粉，水溶性紫杉醇凍干粉屬于紫杉醇微粉類藥物，其具有水溶性較好、毒性較低等特點。為了驗證水溶性紫杉醇凍干粉的抗腫瘤效果，我們通過以下途徑進(jìn)行了研究:
　　1)用紫杉醇敏感人體腫瘤細(xì)胞對水溶性紫杉醇凍干粉進(jìn)行體外活性檢測;
　　2）對S180荷瘤小鼠模型及SKOV-3裸鼠模型進(jìn)行腹腔注射研究水溶性紫杉醇凍于粉體內(nèi)抑瘤活性;
　　3)通過尾靜脈注射水溶性紫杉醇凍干粉進(jìn)行急性毒性試驗，觀察給藥

3、后個體行為狀態(tài);
　　4）利用Caco-2細(xì)胞模型模擬體內(nèi)吸收，檢驗水溶性紫杉醇凍干粉能否作為一種口服劑型被開發(fā)。
　　1.以紫杉醇原料藥為陽性對照，通過MTT比色法研究水溶性紫杉醇凍干粉對紫杉醇敏感腫瘤細(xì)胞的抗腫瘤效果，實驗結(jié)果表明:水溶性紫杉醇凍干粉對人乳腺癌細(xì)胞(MCF-7)、人卵巢癌細(xì)胞(SKOV-3)、人前列腺癌細(xì)胞(PC-3)均有較好的抑制作用，IC50值分別為0.886μM、0.913μM、0.687μM。

4、r>　　2.建立鼠肉瘤S180系小鼠移植瘤模型，隨機(jī)分為6組，通過腹腔注射法給藥，分別注射生理鹽水、已上市的紫杉醇注射液、ABI-007注射液及3種濃度（高劑量，中劑量，低劑量）的水溶性紫杉醇溶液，經(jīng)過注射7d后，斷頸處死小鼠，解剖稱量瘤重。實驗結(jié)果表明:水溶性紫杉醇低劑量組抑瘤率為52.8％，水溶性紫杉醇中劑量組抑瘤率為54.9％，水溶性紫杉醇高劑量組抑瘤率為81.3％，ABI-007對照組的抑瘤率為71.9％，陽性紫杉醇對照組的抑瘤

5、率81.6％。實驗數(shù)據(jù)表明水溶性紫杉醇凍干粉對小鼠移植性腫瘤S-180的生長有明顯的抑瘤作用。
　　3.建立人卵巢癌（SKOV-3）荷瘤裸鼠移植瘤模型，將成長健康的裸鼠隨機(jī)分為5組，分別為生理鹽水組、紫杉醇對照組、ABI-007組、水溶性紫杉醇凍干粉中劑量組、水溶性紫杉醇凍干粉高劑量組，按劑量腹腔注射給藥4周。在給藥期間對SKOV-3荷瘤裸鼠的體重與瘤體積進(jìn)行測量，計算瘤重。水溶性紫杉醇中劑量組抑瘤率為54.9％，水溶性紫杉醇高劑

6、量組抑瘤率為65.1％，陽性紫杉醇對照組抑瘤率57.7％，ABI-007對照組的抑瘤率58.1％。實驗結(jié)果表明:水溶性紫杉醇凍干粉對裸鼠人卵巢癌SKOV-3移植瘤的抑制作用較明顯。
　　4.為了研究水溶性紫杉醇凍干粉對小鼠的急性毒性反應(yīng)本文采用了最大給藥量法，在合理的最大給藥濃度的前提下，以允許的最大劑量20 mg/kg單次尾靜脈注射給藥，同時觀察給藥后昆明小鼠各組的生長狀況，實驗結(jié)果證明:在給藥劑量范圍內(nèi)水溶性紫杉醇凍干粉注射劑

7、的毒性很小，安全系數(shù)高。
　　5.為了檢驗水溶性紫杉醇凍干粉能否開發(fā)成一種新的口服劑型，本文利用Caco-2細(xì)胞模型，對6個濃度（0.5μM、1μM、2μM、5μM、10μM、20μM）下的水溶性紫杉醇凍干粉轉(zhuǎn)運量進(jìn)行了研究，分別考察了從AP側(cè)（頂側(cè)）→BL側(cè)（基底側(cè)）和BL側(cè)→AP側(cè)的跨膜轉(zhuǎn)運特性，水溶性紫杉醇凍干粉的Papp AP→ BL值為20.9±2.1×10-6 cm/s;N=3。吸收效果好的藥物表觀滲透系數(shù)Papp值大