抗癲癇藥物和促智藥物對(duì)癲癇大鼠認(rèn)知功能的影響及海馬組織中NCAM和ERK2的表達(dá)變化.pdf

1、目的：①奧卡西平和卡馬西平對(duì)癲癇大鼠認(rèn)知功能的影響及海馬組織中NCAM和ERK2的表達(dá)變化。②鹽酸多奈哌齊和茴拉西坦對(duì)癲癇大鼠認(rèn)知功能的影響及海馬組織中NCAM和ERK2的表達(dá)變化。
　　 方法：選用Wistar大鼠隨機(jī)分為致癇組，卡馬西平治療3周組、奧卡西平治療3周組、鹽酸多奈哌齊治療3周組、茴拉西坦治療3周組、對(duì)照組，對(duì)照組用生理鹽水造模，另外五組用氯化鋰-匹羅卡品誘導(dǎo)癲癇模型的建立，并建立藥物干預(yù)模型，造模成功后分別觀察大

2、鼠的行為學(xué)改變，然后行Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)，以便來(lái)測(cè)試大鼠的空間學(xué)習(xí)記憶能力。然后解剖大鼠，通過(guò)免疫組化法檢測(cè)海馬中神經(jīng)細(xì)胞粘附分子和細(xì)胞外調(diào)節(jié)蛋白激酶的蛋白表達(dá)，通過(guò)RT-PCR法檢測(cè)海馬中神經(jīng)細(xì)胞粘附分子和細(xì)胞外調(diào)節(jié)蛋白激酶2的mRNA的表達(dá)。
　　 結(jié)果：⑴行為學(xué)觀察：根據(jù)Racine分級(jí)，將大鼠的癲癇發(fā)作分為5級(jí)：Ⅰ級(jí)，全身和面部不自主的小幅度的抽搐、抖動(dòng)；Ⅱ級(jí)，大鼠規(guī)律的點(diǎn)頭，面部肌肉抽搐；Ⅲ級(jí)，一側(cè)前肢抬起，不自主

3、的抖動(dòng)；Ⅳ級(jí)，大鼠站立，雙側(cè)前肢的不自主抖動(dòng)；Ⅴ級(jí)，四肢不自主抖動(dòng)，導(dǎo)致身體失去平衡，躺在地上抖動(dòng)、抽搐，雙眼有時(shí)可見(jiàn)流血。出現(xiàn)Ⅳ-Ⅴ級(jí)連續(xù)癇性發(fā)作而其間不伴有正常行為，認(rèn)為呈癲癇持續(xù)狀態(tài)，此時(shí)造模成功。⑵Morris水迷宮檢測(cè)：各組大鼠在Morris水迷宮8個(gè)時(shí)段的檢測(cè)過(guò)程中，隨著檢測(cè)次數(shù)的增加，大鼠尋找平臺(tái)的時(shí)間逐漸的縮短，大鼠的逃逸潛伏期由長(zhǎng)到短依次為卡馬西平>奧卡西平>致癇組>對(duì)照組；致癇組>茴拉西坦>鹽酸多奈哌齊組>對(duì)照組?？?/p>

4、間探索實(shí)驗(yàn)中大鼠的原平臺(tái)象限游泳時(shí)間百分比從長(zhǎng)到短依次為對(duì)照組>致癇組>奧卡西平組>卡馬西平組；對(duì)照組>鹽酸多奈哌齊組>茴拉西坦組>致癇組。⑶Real Time PCR結(jié)果：NCAM的表達(dá)：致癇組>奧卡西平組>卡馬西平組>對(duì)照組(p<0.01)；鹽酸多奈哌齊>茴拉西坦組>致癇組>對(duì)照組(p<0.01)。ERK2的表達(dá)：對(duì)照組>致癇組>奧卡西平組>卡馬西平組(p<0.05)；對(duì)照組>鹽酸多奈哌齊組>茴拉西坦組>致癇組(p<0.05)。⑷免

5、疫組化中結(jié)果：NCAM的表達(dá)：致癇組>奧卡西平組>卡馬西平組>對(duì)照組(p<0.01)；鹽酸多奈哌齊>茴拉西坦組>致癇組>對(duì)照組(p<0.01)。ERK2的表達(dá)：對(duì)照組>致癇組>奧卡西平組>卡馬西平組(p<0.05)；對(duì)照組>鹽酸多奈哌齊組>茴拉西坦組>致癇組(p<0.05)。
　　 結(jié)論：①氯化鋰-匹羅卡品誘導(dǎo)的癲癇模型，是比較經(jīng)典的而且比較理想的研究顳葉癲癇的模型。②神經(jīng)元的壞死、膠質(zhì)的增生、突觸可塑性的調(diào)節(jié)、苔蘚纖維出芽等與

6、癲癇發(fā)作密切相關(guān)。③癲癇發(fā)作后可導(dǎo)致不同程度的認(rèn)知功能損害。④Morris水迷宮試驗(yàn)可以較準(zhǔn)確地反映動(dòng)物的空間學(xué)習(xí)和記憶能力。⑤卡馬西平和奧卡西平通過(guò)抑制NCAM的表達(dá)，來(lái)有效地保護(hù)癲癇發(fā)作后引起的腦損傷。⑥對(duì)照組通過(guò)Morris水迷宮試驗(yàn)加強(qiáng)了大鼠空間學(xué)習(xí)和記憶能力，因而ERK2的表達(dá)增多，同時(shí)癲癇發(fā)作后大鼠的空間學(xué)習(xí)和記憶能力受損，ERK2的表達(dá)下降，卡馬西平通過(guò)抑制ERK2的表達(dá)，加重了癲癇大鼠的認(rèn)知功能損害。⑦新型抗癲癇藥奧卡西