纖維環(huán)和終板損傷致自免疫椎間盤炎動物模型的影像學(xué)及免疫學(xué)研究.pdf

1、目的：通過手術(shù)破壞纖維環(huán)和軟骨終板建立自免疫椎間盤炎的動物模型，重點探討其病變過程中的影像學(xué)變化及免疫學(xué)表達(dá)，深入探討自免疫因素在椎間盤炎中的作用，使動物模型更具有實際應(yīng)用價值，進(jìn)而為臨床診斷和治療的創(chuàng)新提供理論基礎(chǔ)。 方法：選擇健康成年新西蘭大耳白兔50只，雌雄不限，隨機(jī)分為三組：手術(shù)組(30只)，經(jīng)前外側(cè)入路手術(shù)破壞腰椎間盤纖維環(huán)及上位軟骨終板，建立兔椎間盤炎動物模型；設(shè)立假手術(shù)組(10只)及對照組(10只)。對照組即刻行X

2、線及MRI檢查，處死取腰3/4、腰4/5、腰5/6椎間盤標(biāo)本。假手術(shù)組同手術(shù)組取相同手術(shù)入路，暴露椎間盤但不破壞纖維環(huán)和軟骨終板。手術(shù)組與假手術(shù)組分別于術(shù)后1周、2周、4周、8周、12周分批處死動物，處死取材前行X線片、MRI檢查。取手術(shù)區(qū)椎間盤標(biāo)本，行：(1)大體病理切片，觀察椎間盤及椎體炎癥變化；(2)常規(guī)HE染色，形態(tài)學(xué)比較及淋巴細(xì)胞的表達(dá)；(3)應(yīng)用免疫組化技術(shù)和免疫熒光技術(shù)觀察標(biāo)本CD4陽性、CD8陽性T淋巴細(xì)胞，免疫球蛋白I

3、gG、IgM的表達(dá)。手術(shù)組與假手術(shù)組、對照組進(jìn)行比較以分析各指標(biāo)的表達(dá)及變化過程，探討自免疫反應(yīng)在椎間盤炎中的作用；(4)細(xì)菌學(xué)培養(yǎng)。 結(jié)果：1.影像學(xué)表現(xiàn)：手術(shù)組常規(guī)X線檢查在術(shù)后1周未見異常征象，術(shù)后2周顯示手術(shù)區(qū)椎間隙狹窄，術(shù)后4周手術(shù)椎體骨質(zhì)疏松透過度增加，術(shù)后8周上位椎體密度不均勻，變化累及下位椎體，術(shù)后12周可見變化累及整個上位椎體，骨質(zhì)增生、破壞同時存在。手術(shù)組動物術(shù)后2周MRI出現(xiàn)上位椎體終板及終板下骨的炎性表現(xiàn)

4、，矢狀位T2WI上即可見手術(shù)椎間盤信號異常，呈不同程度的破壞、碎裂、變小，正常髓核的高信號消失，呈低信號改變。終板及終板下椎體松質(zhì)骨有不同程度的侵犯破壞致椎體和椎間盤分界模糊不清，相鄰椎體受累，T2WI上呈混雜斑點狀高信號。術(shù)后4周MRI顯示椎間盤信號改變進(jìn)一步加重，并且手術(shù)區(qū)下位椎體的終板及終板下骨出現(xiàn)信號改變，術(shù)后12周T2WI上可見手術(shù)椎間盤相鄰上位整個椎體高信號。假手術(shù)組與對照組均未見異常。2.大體病理：三節(jié)段椎體矢狀位切片并常

5、規(guī)染色顯示手術(shù)區(qū)椎間盤、終板及終板下骨炎性改變，淋巴細(xì)胞浸潤。3.HE染色：光鏡下可見手術(shù)組椎間盤內(nèi)、外層纖維環(huán)紊亂，失去正常結(jié)構(gòu)，膠原纖維不連續(xù)、增生，外層纖維環(huán)成纖維細(xì)胞增多，術(shù)后1-4周可見淋巴細(xì)胞浸潤，近纖維環(huán)內(nèi)層髓核部分有大量軟骨細(xì)胞增生。假手術(shù)組及對照組則無上述表現(xiàn)。4.免疫組化染色：手術(shù)組1周、2周、4周的標(biāo)本可見近邊緣細(xì)胞浸潤區(qū)有CD4陽性、CD8陽性淋巴細(xì)胞分布，其中CD4陽性淋巴細(xì)胞主要在術(shù)后1周、2周取材的標(biāo)本表達(dá)

6、較多，CD8陽性淋巴細(xì)胞則在術(shù)后2周、4周取材的標(biāo)本表達(dá)較多。而假手術(shù)組則于術(shù)后1周、2周可見有極少量淋巴細(xì)胞表達(dá)，對照組未見淋巴細(xì)胞表達(dá)。手術(shù)組淋巴細(xì)胞表達(dá)與假手術(shù)組、對照組比較具有統(tǒng)計學(xué)意義。5.免疫熒光：手術(shù)組可見手術(shù)椎間盤近邊緣區(qū)免疫球蛋白IgG、IgM呈陽性反應(yīng)，于1周少量表達(dá)，術(shù)后2周、4周、8周大量表達(dá)。假手術(shù)組及對照組均可見IgG極少量表達(dá)，未見IgM表達(dá)。手術(shù)組與假手術(shù)組、對照組比較具有統(tǒng)計學(xué)意義。6.細(xì)菌培養(yǎng)：陰性。