小口徑全生物化異種移植血管制備可行性的實驗研究.pdf

1、研究背景:冠狀動脈旁路移植術(shù)(CABG)是目前外科治療冠心病最有效的手段，全球每年有超過80萬例病人進行冠狀動脈旁路移植術(shù)，對橋血管的需求量非常大。隨著冠狀動脈旁路移植術(shù)的日趨成熟和普及，橋血管移植材料的研究成為人們關(guān)注的重要課題。自體血管是目前臨床上最為常用和較理想的材料，但來源有限，且常因靜脈曲張、畸形、動脈粥樣硬化等原因限制其利用，約有30％的患者缺乏可供移植的自體血管。構(gòu)建組織工程血管是目前解決臨床血管移植物短缺的最好方法，但人

2、工血管及非生物體材料的組織工程血管在構(gòu)建小口徑血管方面效果并不理想。全生物化異種移植血管與機體正常血管結(jié)構(gòu)功能相似，有良好的機械性能，可以自我更新；且能夠避免排斥反應(yīng)、降低感染率，有利于提高移植血管的遠期通暢率。本研究采用脫細胞及肝素處理的方法在短時間內(nèi)制備小口徑全生物化血管材料，以研究新的移植血管來源。
　　 目的:探索和評價酶一去污劑法聯(lián)合肝素結(jié)合處理犬頸動脈，以構(gòu)建小口徑全生物化移植血管，從而提供一種新的移植血管來源。

3、r>　　 方法:
　　 1.于山西醫(yī)科大學(xué)法醫(yī)學(xué)院實驗室取熱缺血時間＜30min的犬雙側(cè)頸動脈，用含抗生素(青霉素鉀1000 U/ml)的生理鹽水沖洗管腔，再輕柔的剝離其外層的疏松結(jié)締組織，然后將所取的血管截成5cm的長度作為實驗材料，放入4℃Hanks液中。實驗分3組：新鮮犬頸動脈(A)組、單脫細胞(B)組和肝素結(jié)合處理(C)組。
　　 2.觀測指標(biāo)：分別取3組的血管標(biāo)本，分別進行HE、VG染色和電鏡觀察，對標(biāo)本的總

4、體形態(tài)學(xué)及膠原纖維和彈力纖維成分進行組織學(xué)評價。應(yīng)用材料性能試驗機測血管標(biāo)本的的機械性能，取B、C兩組標(biāo)本用甲苯胺藍(0.05mg/ml)染色觀察肝素結(jié)合效果和結(jié)合程度，并在體外測定兩組的凝血時間，以比較結(jié)合肝素后的抗凝效果。
　　 結(jié)果:HE染色和VG染色：A組血管壁可見細胞均勻分布，纖維排列致密清晰；B、C兩組血管的細胞成分被完全去除，血管支架的細胞外基質(zhì)成分保留完好，纖維沒有發(fā)生斷裂；與A組相比，B、C兩組支架材料的纖維排

5、列較疏松。VG染色結(jié)果顯示：支架材料的內(nèi)面可清晰顯示完整的內(nèi)彈性膜結(jié)構(gòu)。掃描電鏡觀察：A組血管內(nèi)表面覆蓋著完整的單層內(nèi)皮細胞。經(jīng)過脫細胞處理后，內(nèi)皮細胞層被完全去除，無殘留任何細胞及細胞碎片成分；內(nèi)表面彈性蛋白完整、規(guī)則，為網(wǎng)狀排列，并有規(guī)則的孔隙結(jié)構(gòu)；單根纖維無明顯的膨脹或斷裂。機械性能測試可見3組樣本間的拉伸強度、最大載荷、最大變形量、拉伸率、縫線耐受力并無顯著差異(P＞0.05)，僅B、C兩組的彈性模量小于A組(P＜0.05)。甲