Toll樣受體2、4及髓樣分化因子88在實驗性末端回腸炎發(fā)病過程中的變化及其意義.pdf

1、目的：探討 TLR2、TLR4、髓樣分化因子88(myeloid differentiation factor88,MyD88)在實驗性慢性末端回腸炎發(fā)病過程中表達水平的變化及其相關(guān)意義。
　　方法：60只雄性SD大鼠隨機分成造模組、縫線組、對照組，每組20只。造模組行末端回腸-盲腸側(cè)側(cè)吻合術(shù)，縫線組于回腸末端作手術(shù)縫線，對照組只給予麻醉。術(shù)后2周和8周時每組各取10只SD大鼠，收集距吻合口1-4cm處末端回腸組織，肉眼觀察后行切

2、片鏡下觀察，再分別利用Western Blot和實時定量PCR（Real-Time PCR，RT-PCR）方法，測定實驗性大鼠CTI中TLR2、TLR4、MyD88蛋白表達和mRNA的值，分析三種因子在CTI中的變化及其相關(guān)性。結(jié)果：
　　1.各組SD大鼠死亡率各組死亡率差異無統(tǒng)計學(xué)意義（χ2=2.105,P=0.349）。2.各組SD大鼠的一般情況術(shù)后3天-2周造模組及縫線組SD大鼠均有不同程度的脫毛、精神萎靡、食欲差、體重下降

3、等。在恢復(fù)進食后各組一般情況開始好轉(zhuǎn)，但造模組恢復(fù)較慢，術(shù)后4周-8周三組大鼠無明顯差異（P＞0.05）。3.各組SD大鼠末端回腸組織肉眼觀與病理術(shù)后2周，肉眼及鏡下觀見造模組及縫線組表現(xiàn)為急性炎癥反應(yīng)，兩組炎癥評分均較對照組高；術(shù)后8周，肉眼及鏡下觀見造模組表現(xiàn)為慢性炎癥改變。而縫線組回腸末端組織未見明顯炎性細胞浸潤及結(jié)構(gòu)破壞，造模組炎癥評分比縫線組及對照組均顯著升高。
　　4.各組SD大鼠回腸末端組織TLR2、4及其MyD88

4、的表達水平
　　術(shù)后2周及8周三組SD大鼠TLR2、TLR4、 MyD88的表達水平差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（TLR2：F2W=177.3,P2W=0.000；F8W=594.1,P8W=0.000）；（TLR4：F2W=1113.0,P2W=0.000；F8W=7496.0,P8W=0.000）；（MyD88：F2W=156.1,2W=0.000；F8W=994.7, P8W=0.000），表明三個因子的表達在造模組中有顯著增加。術(shù)后

5、8周與2周對比，縫線組及造模組SD大鼠末端回腸組織中TLR2、TLR4、MyD88的表達水平均有統(tǒng)計學(xué)意義（TLR2：t縫=7.6223,P縫=0.0000；t造=16.7251,P造=0.0000）；（TLR4：t縫=11.0262,P縫=0.0000；t造=76.7887,P造=0.0000）；（MyD88：t縫=24.4459,P縫=0.0000；t造=20.7673,P造=0.0000），且造模組升高明顯較縫線組顯著。結(jié)果表明

6、TLR2、TLR4、 MyD88在末端回腸炎的發(fā)病過程中有明顯的升高，并與末端回腸炎癥存在時間及炎癥程度有相關(guān)性。
　　造模組 SD大鼠不同時間節(jié)點三種因子表達的比較經(jīng)方差分析，它們表達水平差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（F2W=26.0,P2W=0.000；F8W=294.5,P8W=0.000）；且2周至8周TLR2、TLR4、MyD88的升高率分別為158.88％、458.68%、233.87%， TLR4表達水平的升高率更顯著。

7、>　　5.TLR2及TLR4與MyD88的關(guān)系。實驗表明，在實驗性末端回腸炎發(fā)病過程中TLR2、TLR4、MyD88表達呈正相關(guān)，造模組8周， TLR2、TLR4與MyD88的相關(guān)系數(shù)較2周更高，表明三者的表達與炎癥程度呈正相關(guān)。
　　結(jié)論：
　　1.TLR2、TLR4、MyD88在CTI中表達增加，均與炎癥程度呈正相關(guān)；
　　2.TLR4表達水平在CTI發(fā)病時較TLR2及MyD88升高更顯著，推測革蘭陰性菌感染可能是