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文檔簡介
1、目的:觀察大鼠全腦缺血/再灌注(I/R)損傷后海馬TLR3、TRIF、IL-6的表達(dá)規(guī)律,探討TLR3在大鼠全腦缺血/再灌注(I/R)損傷中的意義,為臨床腦梗塞的治療提供新的思路。
方法:取清潔級雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠,隨機(jī)分為假手術(shù)組和I/R組。采用Pulsinelli-Brierley4動脈阻塞方法制作大鼠全腦缺血/再灌注損傷模型,在大鼠全腦缺血15min后,分別再灌注6h、12h、24h、48h
2、、72h、96h,采用RT-PCR方法檢測再灌注后不同時(shí)間的海馬的TLR3、TRIF和IL-6三者mRNA的表達(dá)情況,并分析TRIF mRNA與TLR3 mRNA、IL-6 mRNA與TLR3 mRNA的相關(guān)性,應(yīng)用免疫組織化學(xué)觀察在TLR3mRNA表達(dá)高峰時(shí)TLR3蛋白的表達(dá)情況,應(yīng)用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。
結(jié)果:1. RT-PCR半定量測定顯示:與假手術(shù)組相比,大鼠全腦缺血再灌注12h,海馬TLR3、
3、TRIF和IL-6三者mRNA表達(dá)均開始增加(0.791±0.025)(0.721±0.026)(0.724±0.013),72h達(dá)到高峰(1.370±0.024)(0.992±0.026)(1.121±0.013),96h下降(0.70±0.025)(0.735±0.031)(0.769±0.013)仍高于假手術(shù)組(0.510±0.017)(0.643±0.023)(0.522±0.011),差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),6h時(shí)
4、(0.517±0.015)(0.646±0.026)(0.524±0.011)三者與假手術(shù)組比較沒有差異(P>0.05)。
2.免疫組織化學(xué)結(jié)果顯示:再灌注72h時(shí),I/R組海馬神經(jīng)元陽性細(xì)胞呈棕黃色,有很強(qiáng)的TLR3免疫活性,TLR3抗體結(jié)合主要位于胞漿,多數(shù)陽性細(xì)胞發(fā)生形態(tài)學(xué)改變,呈梭形或條索形,假手術(shù)組未見陽性表達(dá),細(xì)胞形態(tài)基本正常,形態(tài)相對飽滿。
3.相關(guān)分析結(jié)果:TRIFmRNA的表達(dá)與TLR3mR
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