Nischarin在小鼠腦缺血再灌注損傷中的作用.pdf

1、Nischarin是近年來發(fā)現(xiàn)的一種新型蛋白，其表達(dá)分布情況以及功能機(jī)制尚不十分清楚，為數(shù)不多的相關(guān)報道主要聚焦于其抑制腫瘤細(xì)胞遷移和侵襲以及被認(rèn)定為I1-型咪唑啉受體的相關(guān)功能。為了進(jìn)一步探討Nischarin其他方面的功能，我們從迄今為止研究比較透徹的Nischarin抑制腫瘤細(xì)胞遷移侵襲信號通路入手展開進(jìn)一步研究，該通路中Nischarin對p21-活化激酶(p21-activated kinases，PAK)活性具有負(fù)性調(diào)控作用

2、。PAK在神經(jīng)系統(tǒng)中有著諸多方面功能，如參與細(xì)胞凋亡等。相關(guān)報道指出Nischarin同源物咪唑啉受體抗體選擇性蛋白(imidazoline receptorantisera selected protein，IRAS)在細(xì)胞水平具有抑制細(xì)胞凋亡的功能，其機(jī)制也許是抑制了caspase-3的相關(guān)功能。由此我們推測Nischarin在神經(jīng)系統(tǒng)中應(yīng)該存在一定作用。本實(shí)驗研究Nischarin在缺血再灌注損傷(Ischemia/reperfu

3、sion injury, IR)中的具體作用。實(shí)驗方法:western blot和Real-time PCR來檢測C57BL/6雄鼠正常情況下腦部海馬、皮層、小腦、腦干四個區(qū)域Nischarin蛋白水平和mRNA水平表達(dá)情況。采用western blot檢測缺血后再灌注不同時間點(diǎn)小鼠腦組織Nischarin表達(dá)變化情況。側(cè)腦室注射Nischarin激動劑莫索尼定(moxonidine)或者Nischarin抑制劑依法克生（efaroxa

4、n）分別激活和抑制Nischarin信號通路，檢測缺血后12小時和24小時正常組(control)、對照組(vehicle)、激動劑組(moxonidine)和抑制劑組（efaroxan）四組海馬CA1區(qū)神經(jīng)元存活率，iNOS活性，p-PAK和cleaved-caspase-3表達(dá)情況。結(jié)果: Nischarin在正常小鼠腦部四個區(qū)域均有分布且以皮層區(qū)分布為最多;缺血后再灌注24小時內(nèi)Nischarin表達(dá)情況呈現(xiàn)先增高后降低的趨勢;抑