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文檔簡介
1、目的:探討樹突狀細胞(dendritic cell,DC)在實驗性末端回腸炎發(fā)病中的變化及其意義。
方法:120只雄性SD大鼠,被隨機分為Z(造模組)、F(縫線組)、D(對照組)三組,每組40只。上述三組予以不同的實驗處理,Z組將末端回腸、盲腸行側(cè)側(cè)吻合術(shù),形成盲腸-末端回腸反流模型,F(xiàn)組于末端回腸、盲腸處僅作縫線手術(shù),制造與Z組相似的損傷,D組僅行常規(guī)腹腔麻醉。術(shù)后2周、8周每組隨機抽取20只SD大鼠,脫頸處死,取末端回腸組
2、織肉眼觀察并進行炎癥評分,蘇木精-伊紅(hematoxylin-eosinstaining,HE)染色,觀察病理學變化及予以鏡下炎癥評分,免疫組化檢測CD1a、CD83的表達情況并分析,透射電子顯微鏡(Transmission Electron Microscopy,TEM)下觀察DC的形態(tài)特征。
結(jié)果:
1.末端回腸組織肉眼觀察及鏡下觀察術(shù)后2周,Z組、F組均有不同程度的急性炎癥改變,黏膜充血水腫,可見中性粒細胞浸
3、潤,兩組炎癥評分均較D組高(P<0.05);術(shù)后8周,Z組可見典型慢性炎癥改變,炎癥累及黏膜層及黏膜下層,腸壁增厚,絨毛結(jié)構(gòu)不清, 腺體減少或消失,淋巴濾泡增生,淋巴細胞和漿細胞浸潤。而F組、D組未見明顯炎性改變,Z炎癥評分較F組、D組高(P<0.05)。
2.透射電子顯微鏡下觀察DC的形態(tài) D組2周、8周時可見一些DC,細胞體積較小、近似圓型,突起短少,胞質(zhì)密度低,細胞器數(shù)目較少,含較多囊泡狀結(jié)構(gòu),胞核外形不規(guī)則,
4、表面可見凹陷,染色質(zhì)淡,可見核仁,具有未成熟DC的形態(tài)特征。Z組2周、8周時DC數(shù)目明顯增多,細胞體較大,形狀不規(guī)則,細胞表面樹枝樣突起增多、增長,胞漿內(nèi)可見大量的細胞器,囊泡狀結(jié)構(gòu)少,胞核形態(tài)多樣,位于細胞的一側(cè),可見清晰的核膜,胞核異染色質(zhì)增粗,具有成熟DC的形態(tài)特征。
3.末端回腸組織CD1a的表達水平免疫組化染色顯示三組SD大鼠末端回腸組織中CD1a于黏膜及黏膜下層均陽性表達。術(shù)后2周,三組SD大鼠末端回腸組織CD1a
5、陽性細胞浸潤密度進行比較,總體來說差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05),Z組最高,F(xiàn)組其次,D組最低;術(shù)后8周,Z組CD1a陽性細胞浸潤密度最高,較F組、D組比較,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05),而F組較D組,差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。Z組2、8周時,炎癥評分1-4分組、4-8分組、8-13分組三組黏膜中CD1a陽性細胞浸潤密度進行比較,差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05),以8-13分組最高,且CD1a的表達水平與炎癥程度呈正相關(guān)
6、。
4.末端回腸組織CD83的表達水平免疫組化染色顯示Z組、F 組SD大鼠CD83陽性表達,呈棕黃色,主要位于黏膜及膜下層,D組弱表達或不表達。術(shù)后2周,Z組、F組CD83陽性細胞數(shù)明顯增多,上述兩組CD83陽性細胞浸潤密度較D組比較,差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.01),以Z組最高;術(shù)后8周,Z組CD83陽性細胞浸潤密度最高,較F組、D組比較,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05),而F組較D組,差異無統(tǒng)計學意義(P>0.
7、05)。Z組2周、8周時,炎癥評分1-4分組、4-8分組、8-13分組三組黏膜中CD83的陽性細胞浸潤密度進行比較,差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05),均顯著高于D組,且CD83的表達水平與炎癥程度呈正相關(guān)。
結(jié)論:
1.ETI中DC的形態(tài)、結(jié)構(gòu)由未成熟型向成熟型轉(zhuǎn)變,可能與抗原攝取、呈遞功能有關(guān)。
2.ETI黏膜中CD1a+DC、CD83+DC明顯增多,且與炎癥程度呈正相關(guān)。
3.DC形態(tài)、結(jié)構(gòu)
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