苦瓜葉片提取液對(duì)菜粉蝶各蟲期生長(zhǎng)、發(fā)育及蛋白質(zhì)組分的影響.pdf

1、本文利用乙醚，丙酮，清水三種溶劑浸提苦瓜葉片，并分別采用10％、30％、50％三個(gè)不同濃度的提取液涂抹甘藍(lán)葉片飼喂菜粉蝶幼蟲——菜青蟲。比較觀察不同溶劑、不同濃度苦瓜葉片提取液(以下簡(jiǎn)稱提取液)對(duì)菜青蟲生長(zhǎng)、發(fā)育的影響，找出了最佳的提取液濃度，同時(shí)對(duì)菜粉蝶及蛹態(tài)進(jìn)行蛋白質(zhì)雙向電泳分析。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明菜青蟲取食了涂抹提取液的甘藍(lán)葉片后，其取食量明顯降低，行為遲鈍、形態(tài)卷曲，甚至死亡。以清水對(duì)照為準(zhǔn)，不同溶劑提取液對(duì)幼蟲取食量、體重的影響，以

2、乙醚提取液影響最大，作用最強(qiáng)，其次是丙酮和清水；從卷曲率和死亡率來看：仍是乙醚提取液比丙酮、清水的高；當(dāng)試蟲進(jìn)入蛹期時(shí)，卷曲率和死亡率明顯提高；提取液對(duì)化蛹率和羽化率的影響均是乙醚提取液比丙酮和清水的低。無論哪一種溶劑提取液均對(duì)試蟲生長(zhǎng)發(fā)育產(chǎn)生強(qiáng)烈的抑制和毒害作用。三種溶劑比較，以乙醚提取液處理的作用最強(qiáng)。 試驗(yàn)表明10％、30％、50％三種濃度提取液對(duì)菜粉蝶各蟲態(tài)的影響是：每種濃度提取液都對(duì)試蟲生長(zhǎng)、發(fā)育產(chǎn)生強(qiáng)烈的抑制和毒害作

3、用。三種濃度比較，以50％的濃度作用效果最強(qiáng)，而10％和30％的濃度作用效果無明顯差異。采用10％的提取液濃度有利于進(jìn)一步研究提取液對(duì)試蟲下一代的長(zhǎng)效影響和滿足本研究的連續(xù)性，同時(shí)也達(dá)到經(jīng)濟(jì)有效的目的。因此選取10％的濃度為最佳提取液濃度。 運(yùn)用雙向電泳技術(shù)對(duì)試蟲蛹態(tài)進(jìn)行了蛋白質(zhì)變化分析：與清水對(duì)照相比，經(jīng)過乙醚苦瓜葉片10％濃度提取液處理的試蟲，在化蛹初期誘導(dǎo)產(chǎn)生出四個(gè)蛋白組分，分子量和等電點(diǎn)為：66kD／pI5.5，23kD

4、／pI6.5，21kD／pI6.9，21kD／pI7.0，同時(shí)也有分子量和等電點(diǎn)為97kD／pI6.5，80kD／pI7.1，80kD／pI7.2，50kD／pI6.8，50kD)／pI7.1，50kD／pI7.2，30kD／pI6.3，30kD／pI6.5，28kD／pI6.3，23kD／pI7.0十個(gè)蛋白質(zhì)組分缺失；在致畸蛹中誘導(dǎo)產(chǎn)生分子量和等電點(diǎn)為97kD／pI6.7，97kD／pI 6.9，97kD／pI 7.3，21kD／pI

5、 7.5， 21kD／pI 6.0五個(gè)蛋白質(zhì)組分。在致死蛹中誘導(dǎo)產(chǎn)生分子量和等電點(diǎn)為21kD／pI5.9，21kD／pI 6.1，21kD／pI6.5，21kD／pI 6.7四個(gè)蛋白質(zhì)組分。以上這些蛋白質(zhì)組分的增加和缺失可能參與了試蟲體內(nèi)一些生化代謝變化的調(diào)控，與提取液作用有一定的相關(guān)性。 運(yùn)用雙向電泳技術(shù)對(duì)畸形菜粉蝶進(jìn)行了蛋白質(zhì)變化分析，結(jié)果表明：在蛋白質(zhì)圖譜中：畸形蝶蛋白質(zhì)圖譜與對(duì)照蛋白質(zhì)譜型相類似，兩圖譜之間較平行，均可

6、分辨出200個(gè)左右蛋白質(zhì)斑點(diǎn)，等電點(diǎn)處于pI4.5～pI7.5之間，分子量在14～94kD范圍，其中約有50個(gè)左右蛋白質(zhì)含量較豐富。與對(duì)照相比，在畸形蝶圖譜中缺失了兩個(gè)蛋白斑點(diǎn)，分別為：64kD/pI5.5，31kD/pI6.0。誘導(dǎo)產(chǎn)生出15個(gè)新的蛋白斑點(diǎn)，分子量和等電點(diǎn)為：43kD/pI7.0，38kD/pI6.5，31kD/pI7.1，31kD/pI7.2，29kD/pI5.2，25kD/pI5.1，25kD/pI6.1，22kD

7、/pI4.6，22kD/pI4.7，20kD/pI4.8，16kD/pI4.6，16kD/pI6.1，16kD/pI7.1，14kD/pI6.0，14kD／p16.8?？喙先~片提取液作為植物源生物農(nóng)藥具有持效性長(zhǎng)，作用持久的特點(diǎn)，畸形蝶中蛋白質(zhì)組分的增加和缺失與蛹態(tài)中一樣可能參與了試蟲體內(nèi)一些生化代謝變化的調(diào)控，與提取液作用有一定的相關(guān)性。 運(yùn)用電感耦合等離子體發(fā)射光譜儀對(duì)不同溶劑苦瓜葉片提取液常量及微量元素進(jìn)行了分析：與對(duì)照組

8、比較，處理組元素含量有一定變化，元素Na、K、Ca、Sr、Ba的含量是清水>乙醚>丙酮；元素Mg、Mn、Fe、P的含量均是清水>丙酮>乙醚；元素Cu、Zn的含量是乙醚>丙酮>清水。 運(yùn)用雙向電泳技術(shù)對(duì)不同溶劑苦瓜葉片提取液的蛋白質(zhì)進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)了不同的提取液中出現(xiàn)了一些特異的蛋白質(zhì)組分。在乙醚苦瓜葉片提取液中檢測(cè)到的蛋白質(zhì)斑點(diǎn)，其范圍為：97kD～38kD/pI5.5～7.1，與對(duì)照相比，在乙醚提取液中檢測(cè)到4個(gè)著色較深的蛋白質(zhì)