Sox2和Cdx2基因編碼蛋白在胃癌及癌前病變中的表達(dá)及意義.pdf

1、目的： 應(yīng)用免疫組織化學(xué)方法觀察Sox2和cdx2在胃癌及其癌前病變組織中的表達(dá)，分析其與胃癌臨床病理特征的關(guān)系，比較分析Sox2和CdX2與MUC5AC、MUC2/Villin表達(dá)的關(guān)系，探討Sox2、cdX2異常表達(dá)在胃癌發(fā)生發(fā)展中的作用機(jī)制及相互關(guān)系。 材料與方法： 1、臨床病例資料 收集中國(guó)醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院腫瘤外科手術(shù)切除胃癌標(biāo)本257例，其中男134例，女123例；年齡20～80歲，中位年齡

2、60歲。每例均取原發(fā)灶胃癌組織，其中取遠(yuǎn)癌正常粘膜205例，腸上皮化生病灶127個(gè)，不典型增生病灶100個(gè)。257例胃癌中腸型胃癌103例，彌漫型胃癌130例，混合型胃癌24例。組織學(xué)分型：乳頭狀腺癌6例，高分化管狀腺癌19例，中分化腺癌78例，低分化腺癌107例，未分化癌4例，印戒細(xì)胞癌19例，粘液腺癌24例。臨床病理分期：早期胃癌19例，進(jìn)展期胃癌238例。伴淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移176例，無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移81例。所有患者術(shù)前均未做化、放療，臨床病

3、理資料完整。 2、實(shí)驗(yàn)方法 采用EVISION免疫組織化學(xué)染色方法、免疫雙染法和HID-ABpH2.5-PAS粘蛋白組織化學(xué)染色法，觀察Sox2、MUC5AC、Cdx2、MUC2和Villin在胃癌及其癌前病變中的表達(dá)，分析它們表達(dá)的相互關(guān)系。 3、結(jié)果判定 Sox2和Cdx2主要在細(xì)胞核上表達(dá)；MUC2、MUC5AC和Villin主要在細(xì)胞漿內(nèi)表達(dá)。免疫組化結(jié)果由兩位觀察者采用盲法每個(gè)病例隨機(jī)選擇2個(gè)有

4、代表性的高倍視野，計(jì)數(shù)200個(gè)細(xì)胞，按照陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)占同類(lèi)細(xì)胞數(shù)的比例，進(jìn)行等級(jí)劃分。結(jié)果采用半定量計(jì)分法判定，以染色強(qiáng)度與陽(yáng)性細(xì)胞的百分比的乘積作為半定量標(biāo)準(zhǔn)。即A：按陽(yáng)性著色程度評(píng)分0分為無(wú)色；1分為黃色：2分為棕黃色；3分為棕褐色(深淺與背景色相對(duì)比)。B：按陽(yáng)性細(xì)胞所占比例評(píng)分，0分：＜5％；1分：6％～25％；2分：26％～50％；3分： 51％～75％；4分：＞75％。兩者乘積：0分為陰性(-)；1～4分為弱陽(yáng)性(+)；5～8

5、分為中度陽(yáng)性(++)；9～12分為強(qiáng)陽(yáng)性(+++)。在粘蛋白染色的結(jié)果中硫粘蛋白呈深棕色；唾液酸粘蛋白藍(lán)染；中性粘蛋白紅染。 4、統(tǒng)計(jì)分析 本研究所有數(shù)據(jù)均采用x2檢驗(yàn)比較各組間率的差異，應(yīng)用Kendall's tau-b等級(jí)相關(guān)檢驗(yàn)分析等級(jí)相關(guān)性。P＜0.05視為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。所有數(shù)據(jù)均應(yīng)用SPSS 11.5統(tǒng)計(jì)學(xué)系統(tǒng)軟件分析處理。 結(jié)果： 1、Sox2和MUC5AC在正常胃粘膜中的陽(yáng)性表達(dá)率顯著

6、高于胃癌組織中的陽(yáng)性表達(dá)率(P＜0.05)，在腸上皮化生組織中的陽(yáng)性表達(dá)率明顯高于胃癌組織的陽(yáng)性表達(dá)率(P＜0.01)，異型增生病變組織中Sox2和MUC5AC蛋白的表達(dá)率也高于胃癌組織的陽(yáng)性表達(dá)率(P＜0.01)，異型增生和腸上皮化生組織中的陽(yáng)性表達(dá)率也存在差異(P＜0.05)。彌漫型胃癌中Sox2、MUC5AC的表達(dá)顯著高于腸型胃癌(P＜0.05)2、Cdx。 2、MUC2蛋白在胃癌組織中的陽(yáng)性表達(dá)率明顯高于正常胃粘膜中的陽(yáng)

7、性表達(dá)率，P＜0.05；在腸上皮化生組織中的陽(yáng)性表達(dá)率顯著高于胃癌組織的陽(yáng)性表達(dá)率(P＜0.01)；異型增生組織中的陽(yáng)性表達(dá)率與胃癌組織間無(wú)差異(P＞0.05)。Villin蛋白在胃癌組織中的表達(dá)率高于正常胃粘膜中的表達(dá)率P＜0.05)；腸上皮化生組織中的陽(yáng)性表達(dá)率也高于胃癌組織和正常胃粘膜中的陽(yáng)性表達(dá)率(P＜0.05)。腸型胃癌中Cdx2、MUC2、Villin蛋白的表達(dá)水平高于彌漫型胃癌(P＜0.05)。 3、胃癌組織中So

8、x2蛋白的表達(dá)與大體分型、浸潤(rùn)深度和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)(P＜0.05)；MUC5AC的表達(dá)與患者的性別、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、浸潤(rùn)深度密切相關(guān)(P<0.05)：Cdx2蛋白的表達(dá)與浸潤(rùn)深度和組織學(xué)分型密切相關(guān)(P<0.05)；mUC2蛋白的表達(dá)大體分型、浸潤(rùn)深度、組織學(xué)分型密切相關(guān)(P<0.05)；Villin蛋白的表達(dá)與浸潤(rùn)深度和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)(P<0.05)。 4、在胃癌組織中Sox2與Muc5a、Cdx2與MUC2/Villin

9、之間的表達(dá)都呈正相關(guān)(P<0.05)，Sox2的表達(dá)與Cdx2的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)(P<0.05)。 結(jié)論： 1、Sox2在正常胃粘膜中陽(yáng)性表達(dá)最高，隨著胃粘膜的腸化生，Sox2的表達(dá)逐漸減少，提示Sox2對(duì)胃表型的維持起重要的作用。在彌漫性胃癌中Sox2的表達(dá)明顯高于腸型胃癌中Sox2的表達(dá)，提示Sox2可能與彌漫型胃癌的發(fā)生更為密切。 2、Cdx2在腸化生中的陽(yáng)性表達(dá)最高，提示Cdx2對(duì)腸表型的維持起重要作用。在腸