2023年全國(guó)碩士研究生考試考研英語(yǔ)一試題真題（含答案詳解+作文范文）_第1頁(yè)
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1、目的:研究融合型自殺基因Fcy::Fur聯(lián)合5-FC對(duì)卵巢癌細(xì)胞株HO-8910的殺傷效果.方法:1.根據(jù)逆轉(zhuǎn)錄病毒表達(dá)載體pLXSN和LZRSpBMN-Z的多克隆位點(diǎn)及質(zhì)粒pORF5-Fcy::Fur上Fcy::Fur的基因序列,設(shè)計(jì)兩對(duì)PCR引物,在引物的5'端分別引入EcoR Ⅰ和BamH Ⅰ酶切位點(diǎn),采用常規(guī)PCR從pORF5-Fcy::Fur中擴(kuò)增出Fcy::Fur融合基因,經(jīng)核酸序列測(cè)定正確后,分別克隆進(jìn)pLXSN和LZRS

2、pBMN-Z.經(jīng)雙酶切鑒定后,分別轉(zhuǎn)染包裝細(xì)胞PT67和Pheonix,擴(kuò)大培養(yǎng)陽(yáng)性克隆并收集上清,獲得重組逆轉(zhuǎn)錄病毒.2.重組病毒感染靶細(xì)胞HO-8910,分別以G418和嘌呤霉素篩選得到穩(wěn)定表達(dá)Fcy::Fur的陽(yáng)性細(xì)胞株(命名為HO-8910-Fcy::Fur),并經(jīng)抽提細(xì)胞基因組DNA和RNA分別進(jìn)行PCR和RT-PCR等鑒定目的基因的整合與表達(dá).3.在HO-8910-Fcy::Fur中加入前藥5-FC,MTT法測(cè)定腫瘤細(xì)胞殺傷

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