大鼠腹部切口模型的建立和脊髓HMGB1-RAGE表達的變化.pdf

1、目的:1.模擬臨床圍術(shù)期，通過不同程度的切割性損傷，建立腹部切口模型，比較不同程度的手術(shù)創(chuàng)傷導(dǎo)致的應(yīng)激反應(yīng)和生理功能變化，為圍術(shù)期器官損傷、應(yīng)激機制和藥理作用的研究提供穩(wěn)定的動物模型。2.通過觀察脊髓HMGB1、RAGE表達的變化，研究HMGB1/RAGE信號通路在組織損傷和應(yīng)激反應(yīng)中的作用，進一步驗證該動物模型的可靠性。
　　 方法:1.成年雄性SD大鼠36只，根據(jù)手術(shù)切口的不同部位、大小和深度隨機分為6組(n=6):Cont

2、rol組（C組），尾靜脈置管、輸液，丙泊酚靜脈麻醉，右股動脈插管測血壓;Brennan組（B組），參照Brennan模型，于左后足底作長1cm的縱行切口，切割皮膚和肌肉層;Muscle1組(M1組)，劍突下0.5cm作長1cm的縱行切口，切割皮膚和肌肉層;Muscle2組(M2組)，切口長2cm，切割的部位和深度同M1組;Muscle4組(M4組)，切口長4cm，切割的部位和深度同M1組;Skin4組（S4組），劍突下0.5cm作長4c

3、m的縱行切口，僅切割皮膚層。清醒狀態(tài)下行尾靜脈穿刺置管，面罩吸氧，丙泊酚麻醉誘導(dǎo)和維持，麻醉深度調(diào)控在鎮(zhèn)靜狀態(tài)而無明顯鎮(zhèn)痛作用的水平。行右股動脈插管，持續(xù)監(jiān)測平均動脈壓(MAP)、脈率(PR)、呼吸頻率(RR)、體溫(T)等生命體征。術(shù)前、術(shù)后肌注青霉素預(yù)防傷口感染。比較術(shù)中生命體征和術(shù)后體重(BW)、攝食量(FC)的組間差別，觀察行為學(xué)改變和傷口愈合情況。2.術(shù)后滿7天，深麻醉下經(jīng)灌注固定取大鼠脊髓，HE染色行組織形態(tài)學(xué)觀察，IHC法

4、檢測脊髓HMGB1、RAGE的表達水平。
　　 結(jié)果:1.與C組比較，手術(shù)組的MAP較高、PR和RR較快，術(shù)后BW和FC明顯下降;2.M1、M2、M4組的MAP、PR和RR依次遞增，術(shù)后BW和FC的下降程度逐步加重;3.與S4組比較，M4組的應(yīng)激反應(yīng)水平更高，持續(xù)時間更長;4.與M1組比較，B組MAP、PR和RR的水平更高，但術(shù)后FC的下降程度較M1組小;5.術(shù)后7天，相應(yīng)節(jié)段的脊髓HMGB1、RAGE表達水平隨著組織損傷的程度

5、而升高，以M2、M4組陽性表達明顯。以上差別均有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。
　　 結(jié)論:1.本大鼠腹部切口模型建立成功，為研究手術(shù)創(chuàng)傷對機體的影響和不同程度損傷之間的差異性提供實驗平臺。2.隨著創(chuàng)傷程度的加重，腹部切割傷導(dǎo)致的應(yīng)激反應(yīng)加劇;軀體深部組織損傷比淺組織損傷引起更明顯的應(yīng)激反應(yīng)和生理功能障礙;相同程度的切割傷，足底損傷時呼吸、循環(huán)反應(yīng)更大，腹壁損傷時攝食量下降更明顯。3.HMGB1、RAGE在組織損傷和應(yīng)激反應(yīng)的過程