休克腸淋巴液對(duì)小鼠腎組織HMGB1、RAGE表達(dá)的作用.pdf

1、目的：過度炎癥反應(yīng)是重癥失血性休克引起急性腎損傷的發(fā)生機(jī)制之一；失血性休克狀態(tài)下的腸損傷導(dǎo)致的毒性物質(zhì)通過腸淋巴液回流至全身，是引起器官損傷的一個(gè)主要機(jī)制；腸淋巴液引流減輕失血性休克動(dòng)物腎組織損傷與功能障礙的相關(guān)機(jī)制，還需要進(jìn)一步研究。本文目的在于觀察腸淋巴液引流對(duì)失血性休克小鼠腎組織高遷移率族蛋白1（ high mobility group box-1 protein，HMGB1）、晚期糖基化終末產(chǎn)物受體（receptor for a

2、dvanced glycation end products，RAGE）mRNA表達(dá)與蛋白含量以及Nod樣受體家族（Nod-like receptor family, pyrin domain containing，NLRP）3炎癥小體（inflammasome）mRNA表達(dá)的影響；進(jìn)一步將引流至體外的休克腸淋巴液（post hemorrhagic shock mesenteric lymph，PHSML）靜脈輸入正常小鼠，觀察對(duì)腎組織

3、HMGB1與RAGE含量的影響，探討腸淋巴途徑在失血性休克腎損傷發(fā)病學(xué)中的作用。
　　方法：18只野生型C57BL/6J小鼠隨機(jī)均分為：假手術(shù)組、休克組、休克+引流組。休克組、休克+引流組小鼠按我室常規(guī)方法復(fù)制失血性休克模型，維持低血壓40±2 mmHg90 min后，經(jīng)股動(dòng)脈行液體復(fù)蘇（放出的全血加等量林格氏液），30min完成；觀察至輸液結(jié)束后3h。輸液結(jié)束后，按常規(guī)方法引流休克+引流組小鼠的PHSML至3h。假手術(shù)組接受相同

4、的手術(shù)，但不放血、不輸液。各組小鼠在輸液結(jié)束后3h或相當(dāng)時(shí)間點(diǎn)，留取固定位置的腎組織；部分組織用于提取RNA，應(yīng)用qRT-PCR方法檢測(cè)HMGB1、RAGE、NLRP3 mRNA表達(dá)；部分組織用于制備組織勻漿，應(yīng)用ELISA方法檢測(cè)HMGB1、RAGE含量。取6只健康、雄性C57BL/6J小鼠，常規(guī)方法麻醉后，引流正常腸淋巴液（normal mesenteric lymph， NML），持續(xù)1h；將 NML、PHSML分別輸入正常小鼠以

5、及經(jīng) HMGB1抑制劑甘草酸（glycyrrhizin，GL）預(yù)處理的小鼠，均 n=6；3h后留取腎組織，檢測(cè)腎組織HMGB1、RAGE含量。
　　結(jié)果：休克組小鼠腎組織 HMGB1、RAGE、NLRP3 mRNA表達(dá)及HMGB1、RAGE含量均顯著高于假手術(shù)組（P<0.05）；休克+引流組小鼠腎組織HMGB1、RAGE、NLRP3 mRNA表達(dá)及HMGB1、RAGE含量均顯著低于休克組（ P<0.05）。PHSML靜脈輸入增加了

6、正常小鼠腎組織RAGE含量（P<0.05），但對(duì)HMGB1含量無明顯作用（P>0.05）；GL預(yù)處理顯著降低了小鼠腎組織HMGB1、RAGE含量（P<0.05）。
　　結(jié)論：失血性休克提高了小鼠腎組織HMGB1、RAGE mRNA表達(dá)及含量，從而導(dǎo)致NLRP3炎性小體表達(dá)增高，這一因素參與了失血性休克引起的腎損傷；腸淋巴液引流降低了失血性休克小鼠腎組織 HMGB1、RAGE mRNA表達(dá)與含量水平，PHSML增高了正常小鼠腎組織R