TLR2-4在休克腸淋巴液介導(dǎo)小鼠腎組織炎癥反應(yīng)中的作用.pdf

1、失控的炎癥反應(yīng)是重癥失血性休克引起腎損傷的發(fā)生機制之一；失血性休克后，腸道及全身的毒性物質(zhì)經(jīng)腸淋巴液回流至全身，成為器官損傷的一個基本途徑和重要機制；阻斷失血性休克后腸淋巴液（post-hemorahgic shock mesenteric lymph，PHSML）回流的一系列干預(yù)措施在減輕失血性休克模型動物的器官損傷，發(fā)揮著積極的作用。
　　目的：應(yīng)用失血性休克小鼠模型，觀察腸淋巴液引流對失血性休克小鼠腎組織Toll樣受體（To

2、ll-like receptor，TLR）-2、TLR4 mRNA表達以及炎癥介質(zhì)白細胞介素（interleukin，IL）-1β、IL-18水平的影響；將引流至體外的PHSML靜脈輸入野生型、TLR2-/-、TLR4-/-小鼠，觀察對腎組織IL-1β、IL-18含量的變化；探討TLR2/4在休克腸淋巴液介導(dǎo)小鼠腎組織炎癥反應(yīng)中的作用。
　　方法：18只健康、雄性C57BL/6J小鼠隨機均分為：假手術(shù)組、休克組、休克+引流組。常規(guī)

3、方法建立失血性休克模型：低血壓40±2 mmHg維持90 min；行液體復(fù)蘇，30 min完成；觀察至輸液結(jié)束后3 h。在輸液結(jié)束后，休克+引流組引流PHSML至3 h。各組小鼠在輸液結(jié)束后3 h或相當(dāng)時間點，留取腎組織；應(yīng)用qRT-PCR方法檢測TLR2、TLR4 mRNA表達；應(yīng)用ELISA方法檢測IL-1β、IL-18含量。取18只健康、雄性C57BL/6J小鼠，常規(guī)方法引流正常腸淋巴液（normal mesenteric lym

4、ph，NML）；取12只小鼠，建立失血性休克模型，留取液體復(fù)蘇后0~3 h的PHSML。取野生型小鼠、TLR2-/-小鼠和 TLR4-/-小鼠各12只，將 NML與 PHSML分別輸入野生型小鼠、TLR2-/-小鼠和TLR4-/-小鼠（n=6），30 min完成。2.5h后，留取腎組織，檢測IL-1β、IL-18含量。
　　結(jié)果：休克組小鼠腎組織TLR2、TLR4 mRNA表達及IL-1β、IL-18含量均顯著高于假手術(shù)組（ P<

5、0.05）；PHSML引流顯著降低了腎組織TLR2、TLR4 mRNA表達及IL-1β、IL-18含量（P<0.05）。PHSML靜脈輸入正常小鼠，顯著提高了腎組織IL-1β、IL-18含量（P<0.05）；PHSML靜脈輸入TLR2-/-正常小鼠，未引起腎組織IL-1β、IL-18含量出現(xiàn)統(tǒng)計學(xué)差異（P>0.05）；PHSML靜脈輸入TLR4-/-正常小鼠，顯著提高了腎組織IL-18含量（P<0.05），但對IL-1β水平無統(tǒng)計學(xué)影響