葛根素固體脂質(zhì)納米粒的藥動(dòng)學(xué)及其代謝產(chǎn)物研究.pdf

1、目的：了解大鼠灌胃葛根素固體脂質(zhì)納米粒后葛根素的藥動(dòng)學(xué)參數(shù)以及葛根素的組織分布、排泄與代謝情況，并與灌胃葛根素混懸液以及靜脈注射葛根素注射液進(jìn)行比較。
　　 方法：大鼠灌胃葛根素固體脂質(zhì)納米?；蚬辔父鸶鼗鞈乙夯蜢o脈注射葛根素注射液后，使用快速高分離度液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜儀（rapid resolution liquidchromatography tandem mass spectrometry，RRLC-MS/MS）檢測生物樣品

2、中的葛根素以及代謝產(chǎn)物。
　　 結(jié)果：
　　 1.灌胃葛根素固體脂質(zhì)納米粒后葛根素在大鼠體內(nèi)的藥動(dòng)學(xué)參數(shù)：AUC0 →t ：2.48±0.30 mg?h/L，AUC0 →∞：2.64±0.39 mg?h/L，Cmax ：0.33±0.05μg/ml，Tmax ：40 min；t1/2 5.60±1.00 h，MRT ：9.34±1.40 h，Cl ：1.49±0.24 L/h，Vz ：11.83±1.02 L，Vss ：

3、13.71±1.29 L。葛根素固體脂質(zhì)納米粒對(duì)葛根素混懸液的相對(duì)生物利用度為310 ％，其絕對(duì)生物利用度為5.8 ％，葛根素固體脂質(zhì)納米粒與葛根素混懸液生物不等效；與灌胃葛根素混懸液比較，灌胃葛根素固體脂質(zhì)納米粒后葛根素達(dá)峰時(shí)間明顯提前（40minvs 1.5～2 h），消除半衰期明顯延長（5.6 h vs 3.27 h）。
　　 2.大鼠灌胃葛根素混懸液后，葛根素在所取組織中的濃度于2.5h 最高，葛根素在各組織中的分布順序

4、為腎>肝>肺>脾>心>腦（肝與肺、心與腦AUC 接近）；大鼠靜脈注射葛根素注射液后，葛根素在各組織中的分布順序?yàn)楦?腎>肺>心>脾>腦（肺與心AUC 接近）；大鼠灌胃葛根素固體脂質(zhì)納米粒后，葛根素在各組織中濃度均較灌胃葛根素混懸液為高，在肝、腎、肺、脾中葛根素濃度于給藥后1 h 最高，心、腦中最高的葛根素濃度有所延遲，分別出現(xiàn)在2.5h和6 h，葛根素在各組織中的分布為肝>腎>脾>肺>腦>心（肺與脾、腦與心AUC 接近）；葛根素在心、腦

5、組織中的濃度都不高，葛根素包裹在固體脂質(zhì)納米粒中增加了葛根素在腦組織和心臟組織中的分布，特別是腦組織。
　　 3.給大鼠灌胃葛根素固體脂質(zhì)納米粒后，葛根素由糞便中排泄的累積排泄率為34.17 ％，其中的74.76 ％是在灌胃給藥后的4～8h 期間排泄的；24 h 內(nèi)由尿中排泄的葛根素占給藥量的1.79 ％，0～4 h、4～8 h 期間的排泄量分別占由尿排泄總量的30.11％和59.79 ％；24 h 內(nèi)經(jīng)糞便中排泄的葛根素約占排

6、泄總量的95.11 ％；給大鼠灌胃葛根素混懸液后，葛根素由糞便中排泄的累積排泄率為41.56 ％，其中的75.26 ％是在灌胃給藥后的4～8 h 期間排泄的，23.99 ％是在給藥后8～12 h 期間排出的；12 h內(nèi)由尿中排泄的葛根素占給藥量的0.64 ％，0～4 h、4～8 h 期間的排泄量分別占由尿排泄總量的27.91 ％和66.28 ％；24 h 內(nèi)經(jīng)糞便中排泄的葛根素約占排泄總量的98.40％；對(duì)大鼠灌胃葛根素固體脂質(zhì)納米粒或

7、葛根素混懸液后葛根素經(jīng)尿和糞排泄進(jìn)行比較，發(fā)現(xiàn)大鼠灌胃葛根素固體脂質(zhì)納米粒后葛根素經(jīng)尿排泄率是灌胃相同劑量葛根素混懸液后的2.8 倍（1.79 ％vs 0.64 ％），主要是0～8 h 間葛根素的排泄率增加，8～12h的排泄率雖然仍較高，但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＝0.052）；而灌胃葛根素固體脂質(zhì)納米粒后，葛根素經(jīng)糞排泄率雖然低于灌胃葛根素混懸液者，但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＝0.058），12～24h 經(jīng)糞的排泄率較高（P＝0.002）；大鼠經(jīng)尾靜

8、脈注射葛根素注射液24h 內(nèi)，葛根素由尿中排泄的累積排泄率為36.15％，其中的97.43 ％是在前4 h 內(nèi)排泄的；由糞便中排泄的葛根素占給藥量的9.18 ％，其中的99.19 ％是在給藥后的8～12 h之間排出的；24 h 內(nèi)經(jīng)尿中排泄的葛根素占排泄總量的79.64 ％。
　　 4.在靜脈注射葛根素注射液后，對(duì)大鼠血漿樣品進(jìn)行AutoMS 掃描，給藥后血漿樣品的總離子色譜圖較空白血漿樣品多出兩個(gè)色譜峰M1、M2，正離子模式下

9、，二者的準(zhǔn)分子離子均為m/z 593，在負(fù)離子模式方式下，其準(zhǔn)分子離子峰均為m/z 591。
　　 代謝產(chǎn)物可被β-葡萄糖醛酸水解酶水解，而β-葡萄糖醛酸水解酶抑制劑D-葡萄糖二酸 1,4-內(nèi)酯可抑制這一作用。說明葛根素在大鼠血漿中的代謝產(chǎn)物M1、M2 是葡萄糖醛酸結(jié)合產(chǎn)物，核磁共振確定M2 為葛根素-7-O-葡萄糖醛酸苷，推測M1 為葛根素-4 ′-O-葡萄糖醛酸苷；大鼠靜脈注射葛根素注射液后，對(duì)大鼠尿樣進(jìn)行AutoMS 掃描

10、，并與空白尿樣比較，結(jié)果在給藥后的尿樣總離子色譜圖新增3個(gè)色譜峰，經(jīng)過MS n 分析，前兩個(gè)峰與血漿中兩個(gè)代謝產(chǎn)物相同，即為葛根素-4 ′-O-葡萄糖醛酸苷、葛根素-7-O-葡萄糖醛酸苷。在正離子模式下，第3個(gè)色譜峰（M3）的準(zhǔn)分子離子峰為m/z 433，對(duì)m/z 433 進(jìn)行轟擊，其裂解碎片415、397、379、367、351、337、313、283，推測M3 可能是葛根素的羥化產(chǎn)物——羥基葛根素；大鼠灌胃葛根素固體脂質(zhì)納米?；蚬辔?/p>

11、葛根素混懸液后，血漿和尿中亦有代謝產(chǎn)物葛根素-4 ′-O-葡萄糖醛酸苷、葛根素-7-O-葡萄糖醛酸苷，但灌胃給藥后血漿、尿中葛根素代謝產(chǎn)物水平明顯低于靜脈注射相同劑量的葛根素后血漿、尿中的代謝產(chǎn)物水平；大鼠的糞樣中均未發(fā)現(xiàn)有葛根素的代謝產(chǎn)物；
　　 5.大鼠靜脈注射葛根素注射液5min后，血漿中即可檢測到代謝產(chǎn)物M1、M2，血漿中M1 于10～15min 達(dá)到峰值，血漿中M2 于15～30 min 達(dá)到峰值，此后，雖然血漿中M1

12、、M2時(shí)有波動(dòng)，但總體呈緩慢下降趨勢；大鼠灌胃葛根素固體脂質(zhì)納米粒10 min 后即可檢測到代謝產(chǎn)物M2，血漿中M2的動(dòng)力學(xué)曲線多呈雙峰，給藥后2 h 出現(xiàn)第1個(gè)峰，4 h 后再次升高，于給藥后6 h 出現(xiàn)第2個(gè)峰，此后，血漿中M2水平逐漸下降；
　　 6.在健康大鼠原位肝、腸灌注模型中，葛根素的代謝產(chǎn)物相似。
　　 結(jié)論：
　　 1.葛根素包裹在固體脂質(zhì)納米粒中提高了葛根素的生物利用度，可能與改善了葛根素的吸收

13、有關(guān)。
　　 2.葛根素包裹在固體脂質(zhì)納米粒中后增加并改變了葛根素在大鼠體內(nèi)的組織分布，各組織中葛根素濃度均增加，葛根素在肝、脾中的分布增加最多，可能與葛根素固體脂質(zhì)納米粒為單核-巨噬細(xì)胞系統(tǒng)吞噬有關(guān)；腦組織中葛根素分布增加可能與固體脂質(zhì)納米粒能夠更容易通過血腦屏障有關(guān)。
　　 3.葛根素混懸液灌胃后主要經(jīng)消化道排泄，靜脈注射葛根素后主要經(jīng)腎臟排泄，而葛根素固體脂質(zhì)納米粒灌胃后，除了由于吸收增加而經(jīng)腎臟排泄增加外，葛根素