槲皮素口服固體脂質(zhì)納米粒制劑的研究.pdf

1、槲皮素(Quercetin，QT,3,3',4',5,7-五羥基黃酮)是一種天然的黃酮類化合物，具有抗癌防癌、抗自由基、抗貧血、抗炎、抗過敏等多種生物活性及藥理作用。但由于槲皮素親水性及親脂性差、吸收差、口服生物利用度低，限制了其臨床應(yīng)用。固體脂質(zhì)納米粒(Solid lipid nanoparticles，SLN)是以生理相容性好、體內(nèi)可生物降解的天然類脂材料為藥物載體的亞微粒給藥系統(tǒng)。該體系生物相容性好，可提高藥物的生物利用度，并可控

2、制藥物的釋放，適合多種途徑給藥。本文以槲皮素為模型藥物，制備了槲皮素固體脂質(zhì)納米粒(Quercetin-loaded solid lipid nanoparticles，QT-SLN)。通過大鼠體內(nèi)吸收機制、吸收部位和藥動學的研究，考察SLN作為槲皮素口服給藥載體的可能性。 選用乳化蒸發(fā)-低溫固化法制備QT-SLN。以納米粒的形態(tài)、粒徑和包封率為指標，通過單因素試驗考察了表面活性劑、脂質(zhì)材料、有機溶劑、乳化溫度、乳化時間、攪拌速

3、度等因素對QT-SLN制備的影響，篩選出了影響QT-SLN質(zhì)量指標的主要因素。并在此基礎(chǔ)上，以主藥用量、單硬脂酸甘油酯與卵磷脂投料比、表面活性劑用量、表面活性劑用量比(PEG400：吐溫-80)、乳化溫度和乳化時間為考察因素，以納米粒形態(tài)、包封率、載藥量和穩(wěn)定性為評價指標，采用均勻設(shè)計對處方和制備工藝進行了優(yōu)化。優(yōu)化后得到的QT-SLN在透射電鏡下觀察分散性好、圓整、均勻而不粘連，平均粒徑為155.3nm，包封率為91.08％，載藥量為

4、13.20％，Zeta電位為-32.23mV，達到了本課題的預(yù)期目標。 用透析法考察了QT-SLN的體外釋藥行為，并對藥物釋放曲線進行擬合。結(jié)果表明，其體外藥物釋放符合雙相動力學方程，回歸方程為100-Q=98.8731e-0.1042t+42.4531e-0.0258t，(rα=0.9994，rβ=0.9937)，釋藥前期為快速釋藥，后期緩慢釋藥，QT-SLN與槲皮素原料藥相比具有明顯的緩釋作用。穩(wěn)定性研究結(jié)果表明QT-SLN

5、冷藏條件下放置6個月穩(wěn)定性良好。 采用大鼠在體灌流技術(shù)，對QT-SLN在大鼠胃腸道的吸收特性進行了研究。大鼠在體胃吸收試驗表明胃部為納米粒的不良吸收部位，2h的平均吸收百分率僅為6.20％；考察低、中、高濃度QT-SLN供試液的小腸吸收動力學，三者在大鼠小腸的Kα分別為0.0784h-1、0.0780h-1和0.0777h-1，LnX與時間t埕線性關(guān)系，表明納米粒在腸道內(nèi)的吸收主要以被動擴散為主；考察了納米粒的最佳吸收部位，結(jié)果

6、其在整個小腸段都有吸收，十二指腸、空腸、回腸、結(jié)腸的吸收百分率分別為(13.00±2.41)％、(17.57±1.84)％、(30.44±2.21)％、(22.03±1.77)％，可見回腸、結(jié)腸為納米粒的主要吸收部位，十二指腸吸收相對較少。 通過使用熒光偏振和圓二色譜2種實驗技術(shù)，考察了優(yōu)化制備的QT-SLN對大鼠腸黏膜細胞膜脂流動性及蛋白構(gòu)象的影響。結(jié)果表明，制劑能增加膜脂的流動性，并使蛋白結(jié)構(gòu)趨于松散，從而提高了黏膜的通透性

7、，促進了藥物的吸收。 在大鼠體內(nèi)藥物動力學研究中，采用高效液相色譜法檢測大鼠血漿中槲皮素的含量，用3p97藥動學處理軟件對大鼠灌胃槲皮素原料藥和QT-SLN后的血藥濃度數(shù)據(jù)進行處理，確定最佳房室模型，求算藥動學參數(shù)。結(jié)果表明，槲皮素原料藥和QT-SLN在體內(nèi)的藥物動力學過程均符合一室模型。與原料藥組相比，納米粒組體內(nèi)吸收增加，作用時間延長，相對生物利用度為571.4％。 為了獲得更長期的物理化學穩(wěn)定性，方便將納米粒制備成

8、片劑、膠囊、微丸等劑型供日服使用。以4％的甘露醇作為凍干保護劑，成功制備了QT-SLN凍干粉劑。凍干前后，納米粒的相關(guān)質(zhì)量指標如包封率、載藥量、pH未發(fā)生明顯改變。初步穩(wěn)定性實驗顯示其穩(wěn)定性良好。體外釋藥試驗結(jié)果表明，凍干前后制劑釋放規(guī)律相同，兩者的釋藥曲線由雙相動力學方程擬合較好，具有明顯的緩釋特征。 以槲皮素為模型藥物制備口服SLN制劑的研究目前國內(nèi)外尚未見報道。本文研究證實，SLN可以顯著提高或改善水溶性差、口服難吸收藥物