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1、目的:探索使用氯化錳標(biāo)記前列腺癌細(xì)胞株(PC-3)行體外磁共振成像(MRI)的可行性和安全性。
方法:將購買的PC-3進(jìn)行復(fù)蘇、培養(yǎng)和擴(kuò)增。在37℃、5%CO2培養(yǎng)箱中,PC-3與8組含不同氯化錳濃度(0.1mM、0.3mM、0.5mM、1.0mM、2.0mM、3.0mM和5.0mM)的F-12 HAM'S培養(yǎng)基共同培養(yǎng),1小時(shí)后收集,于3.0T磁共振成像儀行磁共振成像。另外,對(duì)不同細(xì)胞數(shù)量級(jí)(1.0×105個(gè)、5.0×1
2、05個(gè)、1.0×106個(gè)和2.0×106個(gè))的標(biāo)記PC-3和不同時(shí)間段(4小時(shí)、24小時(shí)和3天)的標(biāo)記PC-3行磁共振成像。鈣離子通道阻滯劑(維拉帕米)干預(yù)不同時(shí)間段(24小時(shí)和3天)的標(biāo)記PC-3,磁共振成像觀察其信號(hào)強(qiáng)度變化。不同氯化錳濃度標(biāo)記的PC-3及標(biāo)記后不同時(shí)間段的PC-3分別與CCK-8活細(xì)胞計(jì)數(shù)試劑盒反應(yīng)后,酶聯(lián)免疫檢測(cè)儀測(cè)定其吸光度值(OD)。電子顯微鏡觀察標(biāo)記PC-3的變化。
結(jié)果:氯化錳標(biāo)記的PC-3
3、以縮短縱向弛豫時(shí)間T1為主,在T1WI-MRI上顯示為高信號(hào),不同氯化錳濃度標(biāo)記的PC-3的信號(hào)強(qiáng)度與未標(biāo)記的PC-3的信號(hào)強(qiáng)度具有統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性差異(P<0.01)。1.0mM氯化錳標(biāo)記的PC-3在細(xì)胞數(shù)量為5.0×105個(gè)時(shí)即可顯示出高信號(hào)強(qiáng)度。在體外培養(yǎng)的條件下,標(biāo)記后24小時(shí)的PC-3的信號(hào)強(qiáng)度明顯下降,標(biāo)記后3天基本恢復(fù)至未標(biāo)記的PC-3的信號(hào)強(qiáng)度。鈣離子通道阻滯劑(維拉帕米)可影響錳離子在細(xì)胞內(nèi)外的分布并可適當(dāng)延長(zhǎng)氯化錳標(biāo)記的
4、PC-3的成像時(shí)間。標(biāo)記后4小時(shí),除0.1mM氯化錳對(duì)PC-3活性沒有影響(P>0.05)外,其余各濃度組(>0.1mM)的氯化錳對(duì)PC-3均有不同程度的毒性影響(P<0.05);標(biāo)記后24小時(shí)至14天,能形成峰值高信號(hào)強(qiáng)度的標(biāo)記濃度(0.5~1.0mM)的氯化錳對(duì)細(xì)胞的活性影響不明顯(P>0.05)。電子顯微鏡可以觀察到錳離子沉積于個(gè)別線粒體內(nèi),致線粒體腫脹以及部分外膜和嵴消失。
結(jié)論:氯化錳可以有效標(biāo)記PC-3,并能在
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