煙草根系中NtWRKY-R15’UTR和NtNAC-R1功能研究.pdf

1、根系是主要的煙堿合成部位。研究發(fā)現(xiàn)，在煙株打頂后，煙草根系合成煙堿的能力增強。但調節(jié)機制并不清楚。為了研究煙株打頂誘導根系煙堿生物合成信號傳導的分子機制，我們從煙株打頂前后根尖組織的SSH-cDNA文庫中篩選并克隆得到的NtNAC-R1、NtWRKY-R1，以此為研究對象，探討這兩個轉錄因子基因對煙株打頂后誘導根系煙堿合成能力過程中的作用。主要實驗結果如下：
　　1.構建了NtNAC-R1的干擾表達載體（RNAi）pFGC5941

2、-NtNAC-R1，轉化煙草K326，得到了F1代煙株。以移栽后30d的K326煙草品種為材料，以野生型為對照，以前期獲得的NtNAC-R1過表達轉化煙株和上述NtNAC-R1RNAi轉化煙株的F1代進行qPCR檢測PMT、NtWRKY-R1、NtNAC-R1表達變化。結果顯示，NtNAC-R1過表達煙株中的PMT表達水平是對照的1.65倍，而NtNAC-R1RNAi煙株中的PMT表達水平是對照的0.27倍,表明NtNAC-R1參與了打

3、頂傷害誘導煙堿合成的過程；而NtNAC-R1過表達煙株中的NtWRKY-R1表達水平是對照的0.25倍，而NtNAC-R1RNAi煙株中的NtWRKY-R1表達水平是對照的0.17倍，表明NtNAC-R1對NtWRKY-R1表達沒有顯著影響。
　　2.構建了NtWRKY-R1的5’UTR缺失載體，通過瞬時表達分析，結果顯示NtWRKY-R1的5’UTR對NtWRKY-R1的表達具有調控作用。
　　其結果為進一步研究其在煙株打