動脈粥樣硬化血脂異常的炎癥免疫機制及三七皂苷對其影響.pdf

1、心血管疾病每年導(dǎo)致的死亡人數(shù)已列各類疾病之首，是人類健康的頭號殺手。心血管疾病中，動脈粥樣硬化及其并發(fā)癥不僅占有很大比例，而且動脈粥樣硬化還是大多數(shù)心血管疾病的共同病理基礎(chǔ)。大量研究認為血清總膽固醇，低密度脂蛋白—膽固醇的水平都是對冠心病死亡具有意義的預(yù)報因子，血清總膽固醇增高是致動脈粥樣硬化的主要因素，低密度脂蛋白—膽固醇的增高與冠心病日后發(fā)病呈正相關(guān)。但近年臨床流行病學(xué)調(diào)查發(fā)現(xiàn)大約50％的動脈粥樣硬化患者的血脂水平是正常的，說明其他

2、新的重要致病因素的存在。臨床流行病學(xué)調(diào)查還發(fā)現(xiàn)，慢性支氣管炎、前列腺炎、牙齦炎等患者動脈粥樣硬化發(fā)病率高，其缺血性腦中風(fēng)的發(fā)生率也顯著高于非感染/炎癥患者(48％vs24％)，強烈提示炎癥免疫因素在動脈粥樣硬化形成中可能具有重要作用。國外學(xué)者Eynatten等在2004年報道，炎癥可以使糖尿病患者脂蛋白脂酶活性明顯降低。由于脂蛋白酯酶可以水解低密度脂蛋白和乳糜微粒，在脂質(zhì)代謝中具有重要作用，其活性改變必然會使血脂水平受到影響，而血脂水平

3、的異常是動脈粥樣硬化生成的重要因素，對此，國內(nèi)外未見報道。故本實驗通過在體與離體實驗對炎癥因素對動脈粥樣硬化動物血脂水平的影響及其機制進行了探索研究。 三七皂苷(totalsaponinsofPanaxnotoginseng，PNS)是三七的主要有效成分，臨床研究證明其可降血脂，并對多種心血管疾病有良好的防治作用。本實驗在我室既往發(fā)現(xiàn)PNS具有顯著的炎癥免疫調(diào)節(jié)效應(yīng)的基礎(chǔ)上，一并觀察了PNS降血脂作用與其炎癥免疫調(diào)節(jié)效應(yīng)的關(guān)系。

4、 方法采用酵母多糖(3mg/kg，10mg/kg)腹腔注射的方法建立了實驗動物(兔)持續(xù)性全身炎癥模型；在動物試驗中，分別于給藥前、給藥后2、4、6、8周分別用CHOD-PAP法、GPO-PAP法、PVS沉淀法測定血清TC、TG、LDL濃度；于給藥前、給藥后1、3、6、8周用ELISA法測定血清TNF-α水平；于給藥前、給藥后4、8周測定LPL、HL活性(比色法)；于給藥前、給藥后3、6、8周用TBA法測定血清丙二醛濃度；細胞培

5、養(yǎng)成功后，經(jīng)4％多聚甲醛固定后，用蘇丹Ⅳ染色，倒置顯微鏡下觀察。培養(yǎng)液中IL-1的水平用ELISA法測定；細胞內(nèi)膽固醇的測定：首先用Folch法抽提泡沫細胞中脂質(zhì)，然后用CHOD-PAP法進行測定。 結(jié)果1.持續(xù)性全身炎癥模型的建立。Zymosan10mg/kg腹腔注射組外周血白細胞計數(shù)和血清TNF-α水平明顯高于對照組和Zymosan3mg/kg腹腔注射組(p＜0.01)，并在給藥期間無明顯下降；血清TNF-α水平在Zymos

6、an3mg/kg腹腔注射組僅在第二天較對照組有明顯升高，其余時間無明顯差異。相關(guān)分析表明，白細胞計數(shù)與TNF-α水平呈顯著正相關(guān)(r=0.785，p＜0.01)。 2.炎癥刺激組TC水平(以LDL為主)、TNF-α水平和MDA水平均較對照組和單純高脂飲食組有顯著升高，且TNF-α水平的變化與TC水平(以LDL為主)的升高呈顯著正相關(guān)(p＜0.01)。在第六周前，單純高脂飲食組與炎癥刺激組甘油三酯水平無顯著差異，第六周后單純高脂飲

7、食組的甘油三酯水平明顯高于炎癥刺激組(p＜0.05)。而炎癥刺激組LPL活性明顯降低，與TNF-α水平、TC水平(以LDL為主)呈顯著負相關(guān)(p＜0.01)。HL活性變化不明顯。 3.三七組TC水平(以LDL為主)、TNF-α水平和MDA水平均較對照組和持續(xù)性全身炎癥疊加高脂飲食組有顯著降低，且其對TC水平(以LDL為主)升高的治療效果與其降低TNF-α的水平呈顯著正相關(guān)(p＜0.01)，三七治療組TG水平在6至8周較模型組有明

8、顯下降。三七組LPL活性較持續(xù)性全身炎癥疊加高脂飲食組明顯升高，與TNF-α水平、TC水平(以LDL為主)呈顯著負相關(guān)(p＜0.01)。HL活性變化不明顯。 4.炎癥刺激組泡沫細胞內(nèi)膽固醇含量比對照組升高65.53％，PNS組細胞內(nèi)膽固醇含量比炎癥刺激組顯著降低，同時膽固醇含量的變化與培養(yǎng)液中細胞因子(TNF-α)的水平成顯著相關(guān)，且呈劑量依賴性。 結(jié)論1.炎癥刺激可以導(dǎo)致兔血脂代謝紊亂，使血中膽固醇的濃度明顯升高，且其

9、中以低密度脂蛋白膽固醇的升高為主。其機制與炎癥刺激使TNF-α等炎癥因子水平升高，從而降低脂蛋白脂酶活性有關(guān)。2.炎癥刺激可以增加細胞TNF-α、IL-1的分泌，明顯促進氧化型低密度脂蛋白向巨噬細胞內(nèi)的聚集，從而促進泡沫細胞的形成。三七皂苷可以降低由炎癥引起的泡沫細胞內(nèi)脂質(zhì)沉積的增加，減少泡沫細胞的形成。其機制與三七皂苷減少炎癥因子分泌量的作用有關(guān)。3.三七皂苷可以明顯改善炎癥刺激導(dǎo)致的血脂代謝紊亂，降低血清中膽固醇的含量(以低密度脂蛋