Fis1和Mfn1表達(dá)及氧化應(yīng)激在慢性氟中毒大鼠腎小管上皮細(xì)胞線粒體損傷中的作用.pdf

1、目的:研究線粒體分裂蛋白1(Mitochondrialfissionprotein1,Fis1)和線粒體融合蛋白1(Mitochondrialfusinprotein1,Mfn1)表達(dá)及氧化應(yīng)激在慢性氟中毒大鼠腎小管上皮細(xì)胞線粒體損傷中的作用,探討慢性氟中毒腎臟細(xì)胞線粒體損傷發(fā)病機(jī)制,為地方性氟中毒的防治提供理論依據(jù)。
　　方法:L60只SD(SpragueDawley)大鼠隨機(jī)分為3組,每組20只,組內(nèi)雌雄各半;對(duì)照組飲用自來水

2、(含氟量低于0.5mg/L),低氟組、高氟組分別飲用加氟10mg/L、50mg/L的自來水。分別于3、6個(gè)月末經(jīng)股動(dòng)脈放血處死大鼠后取腎臟組織;采用氟離子選擇電極法檢測大鼠尿氟;采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR法和免疫組織化學(xué)法檢測腎臟組織Fis1和Mfn1表達(dá);采用硫代巴比妥酸法測定丙二醛(Malondialdehyde,MDA),比色法測定總抗氧化能力(Totalantioxidantcapacity,T-AOC);光鏡觀察腎臟組織學(xué)結(jié)構(gòu),透

3、射電鏡觀察腎小管上皮細(xì)胞線粒體超微結(jié)構(gòu);實(shí)驗(yàn)結(jié)果作統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。
　　結(jié)果:(1)染氟組大鼠出現(xiàn)不同程度的氟斑牙,高氟組重于低氟組。(2)染氟組大鼠尿氟含量高于對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。(3)染氟組大鼠腎臟組織Fis1在轉(zhuǎn)錄水平和蛋白水平表達(dá)高于對(duì)照組,而Mfn1在轉(zhuǎn)錄水平和蛋白水平表達(dá)低于對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。(4)染氟組大鼠腎臟組織MDA水平高于對(duì)照組,而T-AOC水平低于對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)

4、意義(P<0.05)。(5)光鏡下可見染氟組大鼠腎小管上皮細(xì)胞胞漿疏松淡染。(6)透射電鏡下可見染氟組大鼠腎小管上皮細(xì)胞線粒體嵴模糊或者消失和線粒體腫脹,線粒體分裂截面出現(xiàn)。
　　結(jié)論:攝入過量的氟引起染氟組大鼠腎臟組織Fisl在轉(zhuǎn)錄水平和蛋白水平表達(dá)升高,Mfn1在轉(zhuǎn)錄水平和蛋白水平表達(dá)降低,促進(jìn)線粒體分裂并抑制線粒體融合,導(dǎo)致融合分裂失衡和線粒體超微結(jié)構(gòu)改變。Fis1和Mfn1表達(dá)與氧化應(yīng)激之間存在相互影響的可能,該過程在慢性